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如何在大肠杆菌中表达拟南芥中的e3泛素连接酶

来源:飒榕旅游知识分享网

1、首先,需要获取拟南芥中E3泛素连接酶的基因序列。
2、其次,将目的基因克隆到适合在大肠杆菌中表达的载体上,如pET系列载体。
3、然后,将构建好的表达载体转化到大肠杆菌感受态细胞中。
4、然后,使用适当的诱导剂诱导目的基因的表达。
5、然后,通过SDSPAGE或Westernblot等方法检测目的蛋白的表达情况。
6、最后,表达量不理想可以优化培养条件、诱导剂浓度和时间等因素。

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