MM_FS_CNJ_0137 出口肉及肉制品中育畜磷残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0137出口肉 肉制品 禽肉 育畜磷 残留量 气相色谱法 外标法定量

MM_FS_CNJ_0137

     出口肉及肉制品中育畜磷残留量检验方法

1.适用范围

    本方法适用于出口牛肉中育畜磷残留量的检验。

2.原理概要

    试样中的育畜磷残留经正己烷提取，乙腈分离，硅酸柱净化，用配有氮磷检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。

3.主要试剂和仪器

3.1.主要试剂

    正己烷：重蒸馏；

    乙腈：重蒸馏；

    二氯甲烷：重蒸馏；

    洗脱液：乙腈-二氯甲烷-正己烷(4＋6＋90)；

    无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，置于干燥器内备用；

    硅酸：100目；

    助滤剂：硅藻土5型，化学纯；

    玻璃棉；

    硅酸净化柱：300mm×20mm(id)玻璃柱，依次加入少量玻璃棉，20g无水硫酸钠，10g硅酸，20g无水硫酸钠和玻璃棉；

    育畜磷标准品：纯度≥99%；

    育畜磷标准储备溶液：准确称取适量的育畜磷标准品，用正己烷配成浓度为100μg/mL的标准储备溶液，根据需要再用正己烷稀释配成适当浓度的标准工作溶液。   4℃保存。

3.2.仪器

    气相色谱仪，配有氮磷检测器；

    微量注射器：10μL；

    高速组织捣碎机；

    恒温水浴；

    均质器；

    旋转蒸发器；

    马弗炉；

    分液漏斗：500mL；

    锥形烧瓶：300mL，500mL；

    斯奈德柱；

    电加热板。

4.试样的抽取与制备

4.1.检验批

    以不超过2500件为一检验批。

    同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量

4.3.抽样方法

    按规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品，总量不少于2kg。放入清洁容器内，加封后，标明标记及时送交实验室。

    如每件中无小包装，或有小包装但每袋重量超过2kg，则可用灭菌的锋利刀具在抽出的包件中，每件割取不少于100g样品，混合后置洁净容器内，作为混合原始样。混合原始样的总量不得少于2kg。盛于清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。

4.4.试样制备

    从取回的样品中取部分有代表性样品，将可食部分放入高速组织捣碎机中捣碎均匀。充分混匀，用四分法缩分出不小于500g试样，装入洁净容器中，加封后，标明标记。

4.5.试样保存

    将试样于－18℃以下冷冻保存。

注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5.过程简述

5.1.提取

    称取试样约20g(精确至0.1g)置于均质器中，加20g无水硫酸钠，150mL正己烷，高速均质5min，移入500mL烧杯，加2g助滤剂，在电热板上加热至近沸腾，滤入500mL锥形瓶中；用150mL热的正己烷洗涤均质器、烧杯和过滤器，洗液并入锥形瓶中。用斯奈德柱蒸馏，浓缩溶液至50mL。将浓缩液转入500mL分液漏斗，用50mL正己烷洗涤锥形瓶，洗液并入分液漏斗中。用4×50mL乙腈操作4次，每次振荡2min，待两相分离后，收集乙腈相于300mL锥形瓶中。用斯奈德柱蒸馏，浓缩至10～15mL。剩余10～15mL乙腈，加正己烷一起蒸发而驱除之。共4次，每次加25mL正己烷，蒸至10～15mL时再加下一次。最后留下体积为10～15mL。在40℃以下减压蒸发至干，残渣溶于5mL正己烷。

5.2.净化

    用50mL洗脱液预洗硅酸柱。将上述溶液移入柱子，并用20mL正己烷淋洗。用65mL洗脱液淋洗，换接受器后，用95mL洗脱液洗脱育畜磷(每批硅酸必须校正，通过试验确定洗脱液的用量)。用斯奈德柱蒸发洗脱液，并浓缩至10～20mL，冷却烧瓶，在40℃以下减压蒸发至干。准确加入2mL正己烷以溶解残渣，供气相色谱测定。

5.3.测定

5.3.1.色谱条件

色谱柱：DB-5大口径石英毛细管柱，50m×0.53mm(id)，膜厚5.0μm或相当的色谱柱；

柱温：260℃；

进样口温度：270℃；

检测器温度：260℃；

氮气：纯度≥99.99%；柱流速4mL/min；辅助气25mL/min；

空气：100mL/min；

氢气：3mL/min；

进样方式：无分流或直接进样。

5.3.2.色谱测定

    分别准确注射2μL样液及标准工作溶液于气相色谱仪中，按5.3.1色谱条件进行色谱分析，响应值均应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，育畜磷保留时间约为2.5min。标准品色谱图见附录A中图A1。

5.4空白试验

    除不称取样品外，按上述测定步骤进行平行操作。

6.结果计算

    用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中育畜磷残留含量：

式中：X——试样中育畜磷残留含量，mg/kg；

A——样液中育畜磷峰面积，mm²；

A_s——标准工作液中育畜磷峰面积，mm²；

c——标准工作液中育畜磷的浓度，μg/mL；

V——样液最终定容体积，mL；

m——最终样液相当的试样量，g。

注：空白值应从计算结果中扣除。

7.低限、回收率测定

7.1.测定低限

    本方法测定低限为0.010mg/kg。

7.2.回收率

    回收率的实验数据：

育畜磷添加浓度在0.010mg/kg时，回收率为88.0%；

育畜磷添加浓度在0.100mg/kg时，回收率为92.0%；

育畜磷添加浓度在1.000mg/kg时，回收率为88.3%。

8.来源：

    SN 0531—1996