MM_FS_CNJ_0177 出口水产品中毒杀芬残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0177出口水产品 毒杀芬 残留量 气相色谱法 外标法定量

MM_FS_CNJ_0177

出口水产品中毒杀芬残留量检验方法

1.适用范围

本方法适用于出口鲅鱼、扇贝柱中毒杀芬残留量的检验。

2.原理概要

样品中的毒杀芬经用石油醚提取，净化、浓缩后，用配有电子俘获检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。

3.主要试剂和仪器

3.1.主要试剂

    无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，置于干燥器内备用；

    无水硫酸钠柱：25mm(id)×200mm玻璃柱，内装50mm高的无水硫酸钠；

    石油醚：30～60℃，经全玻璃装置重蒸馏；

    乙醚：经全玻璃装置重蒸馏；

    乙腈：色谱纯，用石油醚饱和；

    氯化钠溶液：饱和溶液；

    弗罗里硅土：675℃灼烧2h，置于干燥器内，用前于130℃烘5h；

    弗罗里硅土柱：22mm(id)×200mm玻璃柱，内装100mm高的活化的弗罗里硅土，顶上加10mm高的无水硫酸钠；

    毒杀芬标准品：已知纯度(约78%)；

    毒杀芬标准储备溶液：准确称取适量的毒杀芬标准品，用石油醚配成浓度为100μg/mL的标准储备溶液，根据需要再配成适当浓度的标准工作溶液。

3.2.仪器

    气相色谱仪：配有电子俘获检测器；

    微量注射器：10μL；

    高速组织捣碎机；

    恒温水浴；

    马弗炉；

    烘箱；

    旋转蒸发器或K-D浓缩器；

    分液漏斗：1000mL，125mL；

    刻度试管：10mL，具磨口塞。

4.试样的抽取与制备

4.1.检验批

    以不超过10000件为一检验批。

    同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量

4.3.抽样方法

    按规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取500g为原始样品，原始样品总量不少于2kg，加封后，标明标记，及时送实验室。

4.4.试样制备

    将抽取的样品去鳞、去骨后，将可食部分充分捣碎，充分混匀，用四分法缩分出不少于1000g，作为试样，装入清洁的容器中，加封后，标明标记。

4.5.试样保存

    将试样于－18℃以下冷冻保存。

注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5.过程简述

5.1.提取

5.1.1.鱼类

    称取约50g(精确至0.1g)试样于高速组织捣碎机中，加100g无水硫酸钠，混匀。加150mL石油醚，均质2min。上清液通过铺有两层滤纸的12cm布氏漏斗滤入500mL抽滤瓶中。用2×100mL石油醚提取捣碎机中残渣，每次3min，过滤，合并提取液。转移残渣至布氏漏斗上，以3×50mL石油醚洗涤。全部滤液过无水硫酸钠柱，收集流出液。用少量石油醚洗柱，合并石油醚流出液。于旋转蒸发器中蒸发至近干，用少量石油醚转移残渣至已知重量的烧杯中，在60℃水浴上蒸发，得到脂肪，称量并记录脂肪量。

    称取3g脂肪于125mL分液漏斗中，加石油醚使之总体积为15mL，加30mL用石油醚饱和的乙腈，振荡1min。分层后，放乙腈层至盛有650mL水、40mL饱和氯化钠溶液及100mL石油醚的1L分液漏斗中。用3×30mL石油醚饱和的乙腈液洗125mL分液漏斗中的液体，合并乙腈层于1L分液漏斗中。放1L分液漏斗中的水层至另一1L分液漏斗中，加100mL石油醚至第二个分液漏斗中，振摇15s，弃去水层。合并石油醚层，以2×100mL水洗涤。将石油醚层过无水硫酸钠柱、收集于500mLK-D浓缩器中，以3×10mL石油醚洗涤漏斗及柱。合并石油醚洗液于浓缩器中，浓缩至5～10mL。

5.1.2.扇贝柱

    称取约100g(精确至0.1g)试样于高速组织捣碎机中，加200mL乙腈，均质2min，通过铺有滤纸的12cm布氏漏斗滤入500mL抽滤瓶中。转移滤液至1L分液漏斗中，加100mL石油醚，振摇1～2min，再加10mL饱和氯化钠液和600mL水，振摇30～40s。弃去水层。以2×100mL水洗涤。转移溶剂层于100mL具塞量筒中，加15g无水硫酸钠，振摇，转至K-D浓缩器上浓缩至5～10mL。

5.2.净化

    用50mL石油醚预洗弗罗里硅土柱，将试样提取液移入柱中，以5mL/min速度过柱，用200mL乙醚-石油醚(6＋94)以5mL/min速度洗脱。收集洗脱液，于旋转蒸发器上浓缩至5mL。

5.3.测定

5.3.1.色谱条件

色谱柱：玻璃柱，2m×2mm(id)，填充物为1.95%OV-210＋1.5%OV-17，涂于Chromosorb WhP；

柱温：195℃(10min)  ^10℃/min   225℃(8min)；

进样口温度：250℃；

检测器温度：300℃；

载气：氮气，纯度大于等于99.99%，30mL/min。

5.3.2.色谱测定

    分别准确注射1μL样液及标准工作溶液于气相色谱仪中，按5.3.1条件进行色谱分析，响应值均应在仪器检测的线性范围内。毒杀芬含量采用最后四个峰的峰面积总和进行定量(峰V，W，X，Y)。在上述条件下，峰V、W、X、Y的保留时间分别为14.5min、15.3min、17.0min、18.2min。

5.4.空白试验

    除不称取样品外，按上述测定步骤进行。

6.结果计算

    用色谱数据处理机或按下式计算试样中毒杀芬残留含量：

式中：X——试样中毒杀芬残留含量，mg/kg；

A——样液中毒杀芬四个峰的峰面积之和，mm²；

A_s——标准工作溶液中毒杀芬四个峰的峰面积之和，mm²；

c——标准工作溶液中毒杀芬的浓度，μg/mL；

V——最终样液体积，mL；

m——最终样液相当的样品重量，g。

注：空白值应从计算结果中扣除。

7.测定低限、回收率

7.1.测定低限

    本方法的测定低限为0.5mg/kg。

7.2.回收率

    回收率的实验数据：毒杀芬添加浓度在0.5～5.0mg/kg范围内，回收率为84.5%～.5%。

8.来源：

    SN 0502—95