AM-AM-FS-Is-0203 奶及干奶-碘化物含量的测定-高效液相色谱法

AMAMFSIs0203  奶  干奶  碘化物  高效液相色谱法

AM-AM-FS-Is-0203

奶及干奶－碘化物含量的测定－高效液相色谱法

1 适用范围

此方法适合于测定巴氏消毒全脂奶和干燥的脱脂奶中的碘化物。其碘化物含量范围分别为0.03μg/g-1μg/g和0.3μg/g-10.0μg/g。本方法测量的是游离碘。

2 原理概要

    将试样溶于水，250000膜过滤除去不溶物及高分子量物质。用反相离子对HPLC分离出碘化物离子，电化学检测器检测，银电极工作电压从0~50mV 。碘化物含量由标准曲线中得出。

3 仪器和试剂

3.1 仪器

分析天平   0.01g

容量瓶  100mL；1000mL

微量取液器  20μL；50μL；150μL；250μL

刻度移液管  2mL  最小刻度为0.1ml

量筒  500mL

pH计

膜过滤器  1.2μm和0.5μm尼龙66或与其相当。

离心机     能装50ml离心试管并产生1000g的速度。

离心试管  50ml

HPLC装置泵、注射器、分析柱（PARTISPHERE  C-18,5μm,4.7mm×110mm,其它性能相当的柱子）、保护柱(选择使用规格为SPHERI-5  C-18，3.2mm×15mm或其它性能相当柱) 电化学检测器、积分仪

3.2 试剂

水  符合ISO 3693中级别2

碘化物贮备液  100mg/L 存于暗处，稳定期一个月。

碘化物标准溶液  20、50、150、250µg/L

乙腈，HPLC级

CH₃(CH₂)₁₅N(CH₃)₃Cl  25%(质量)水溶液，离子对色谱级

HPLC洗脱液  pH=6.8

正戊醇

4 方法概述

4.1 采样 按ISO707

4.2 制备测试样品

牛奶样品在20℃±2℃仔细混合。如果脂肪分散和均匀，应先缓慢加热样品至40℃，轻柔混合，然后冷却样品至20℃±2℃。

干奶样品用两倍体积的容器盛装，密封盖住容器，振摇、翻转容器混合均匀。

称取45g±5g（准确至0.1g）的牛奶于100mL容量瓶中，定容。

称取4.2g±0.2g的dried milk制品于100mL容量瓶中，加入一定量的水，配成溶液后加入正戊醇，混合均匀，定容。

4.3 HPLC测定

    乙腈：水（1：1）冲洗色谱柱，进50μl250μg/L的碘溶液至相邻两次进样峰保留时间和峰高保持常数，相差在3%之内。

分别注入四种碘化物标准工作液，测定其峰高或峰面积。注入待测试样，测定其峰高或峰面积。

5 计算、结果表达及重复性

5.1 计算

碘化物含量

w_I=0.1w_t/m

w_I：测试样品中碘化物含量  mg/g

w_t：由回归曲线中计算得到的测试样品中碘化物含量  mg/g

m：测试样品质量  g

5.2 结果表达

牛奶中碘化物含量低于0.1μg/g时，结果保留3位小数。

牛奶中碘化物含量介于0.1μg/g-1μg/g时，结果保留2位小数。

干燥奶中碘化物含量低于1μg/g时，结果保留2位小数。

牛奶中碘化物含量介于1μg/g-10μg/g时，结果保留1位小数。

5.3 重复性

应至少有95%的把握保证在同样条件下，两个实验的绝对误差在这两个实验算术平均值的25%以内。

6 来源

国际标准化组织：ISO 14378