人教版高中生物 选修1专题2课题1微生物的实验室培养(练)(教师版)

选修1专题2课题1微生物的实验室培养（练）

1. 下图是从葡萄果实上获取酵母菌菌种的简要操作步骤。在下列相关叙述中不正确的是（ ）

A. 图中接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法 B. 图中①、②、③步骤都必须确保是无菌操作 C. 图中选择培养基为固体，而扩大培养的培养基为液体 D. 扩大培养酵母菌过程中为加快酵母菌繁殖需要通入空气 【答案】D

【解析】微生物培养中常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，A项正确；微生物培养过程必须保证无菌操作以防止杂菌污染，B项正确；在进行酵母菌筛选时用MS固体培养基，而进行扩大培养时用的是液体培养基，C项正确；酵母菌为兼性厌氧菌，所以在扩大培养酵母菌过程中为加快酵母菌繁殖需要通入无菌空气，否则会造成杂菌污染，D项错误。 2.如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是 （ ）

A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌 B．划线操作应在火焰上进行 C．在5区域中才可以得到所需菌落

D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌 【答案】D

【解析】进行微生物平板划线操作之前，要将接种环放在酒精灯火焰上灼烧灭菌，直到接种环烧红，A项错误；划线操作应在火焰旁进行，不能在火焰上进行，B项错误；平板划线分离微生物的原理就是通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。5区域是最后一个区域，因此，有可能在5区域得到所需菌落，但在4区域也有可能得到所需菌落，C项错误；操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，因此，在12345区域中划线

前后都要对接种环灭菌，D项正确。 3.获得纯净培养物的关键是（ ）

A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B．接种纯种细菌 C．适宜环境条件下培养 D．防止外来杂菌的入侵 【答案】D

【解析】获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌，只是防止外来杂菌入侵的一个方面，故A项错误，D项正确；接种纯种细菌是获得纯净培养物的前提，C项错误；培养环境不能防止杂菌的污染，C项错误。

4.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是（ ） A．操作顺序为计算、称量、熔化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置 【答案】A

【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A项错误；将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，当牛肉膏融化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸，B项正确；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，C项正确；待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，D项正确。

5. “做生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确是（ ）

A. 高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D. 用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上 【答案】D

【解析】高压灭菌加热结束时，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，打开盖子，如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内液体会冲出容器，造成污染，A错误；倒平

板时，培养皿盖打开一缝隙，不能放到一边，B错误；接种时，接种环经火焰灭菌冷却后挑取菌落，不能趁热挑取，以免杀死微生物，C错误；由于平板倒过来放置，则用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上，D正确。 6.关于灭菌和消毒的不正确的理解是（ ） A.消毒和灭菌实质上是相同的

B.灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子 C.接种环用烧灼的方法灭菌

D.常用灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法 【答案】A

【解析】灭菌是将处理物体中的一切生物全部杀灭，在经过灭菌后的物体中，不再存在任何活着的生命；消毒是将物体中的微生物减少到不再危害人体（或其他需要保护的生物体）的程度，A.错误；灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物细胞（包括芽孢和孢子），B.正确；金属接种工具常用灼烧灭菌，C正确；生产中常用的灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法，D正确。 7. 有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（ ） A. 首先将菌液进行一系列的梯度稀释

B. 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C. 在适宜的条件下培育

D. 结果都是可在培养基表面形成单个的菌落 【答案】D

【解析】稀释涂布法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养，A、B、C正确；只有稀释度足够大，才可以在培养基表面形成单个的菌落,D错误。

8.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中，错误的是 （ ） ．．A．操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸 C．灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂，并使其溶解 D．将培养基冷却到约50 ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板 【答案】C

【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序：计算、称量、熔化、灭菌、倒平板,A

正确；牛肉膏容易吸潮．所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸，B正确；待培养基冷却至50℃，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态在酒精等附近进行倒平板，保证无菌环境；平板冷却几分钟后还需倒置。 9.关于平板划线法和涂布平板法的叙述不正确的是（ ） A．能应用于固体培养基接种 B．都可以用于微生物的计数 C．接种培养后可获得单菌落 D．接种用具需进行严格灭菌 【答案】B

【解析】都能应用于固体培养基接种 ，A正确。稀释涂布平板法用于微生物的计数，B错。单个微生物在培养基繁殖形成单个菌落，C正确。接种用具需进行严格灭菌，避免污染杂菌，D正确。

10. 在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图，且甲乙的对应位置不变。有关叙述，错误的是（ ）

A. 配制培养基时需进行髙压蒸汽灭菌 B. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 C. 图示接种过程中接种环至少灼烧了5次 D. 甲中a区域为划线的起始位置 【答案】D

【解析】为了能彻底灭菌，配制的培养基需进行髙压蒸汽灭菌，A正确；连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落，B正确；由于每次使用接种环前后都要灼烧灭菌，从图示甲中4次划线接种就可推出，接种过程中接种环至少灼烧了5次，C正确；起始划线的区域长出的菌落多且密，根据甲乙对应区域对比，甲中a区域为划线的结束位置，D错误。

11.在调查某湖水中H细菌指数（1升水中含有的H细菌个数）的实验中，先将5升湖水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样l毫升，涂布到4个培养皿中培养，培养后统计的菌落数分别是42、38、55、18。请回答：

（1）培养基中的蛋白胨和淀粉为细菌生长提供了_______________。

（2）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水水样的平板置于____________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种__________ 作为对照。

（3）细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为__________。根据上述结果计算，被检样的H细菌指数为_________。用这种方法测定密度，实际活菌数目要比测得的数目___________，原因是______________

。

（4）为了纯化获得的H细菌，在微生物的实验室培养过程中，关键是________ ，而实验结束后，使用过的培养基应该进行_________________处理后才能倒掉。

【答案】（1）氮源、碳源（2）恒温培养箱 等量无菌水（3）种群 45 多 当两个或多个细胞连在一起时在平板上观察到的是一个菌落（4）无菌操作（防止杂菌污染） 灭菌 【解析】（1）蛋白胨含有氮，通常作为氮源和提供微生物，淀粉通常作为碳源。

（2）恒温培养箱能够保证细菌生长最适温度，故细菌数量增长较快。在另一平板上接种等量无菌水作为对照，判断细菌数量。

（3）细菌培养产生的单个肉眼可见的子细胞群体称为菌落，生态系统中称为种群，去掉18这个偏差较大组，其他3组（42、38、55）取平均值为45。用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于两个或多个细胞连在一起时在平板上观察到的是一个菌落，所以实际活菌数目要比测得的数目多。

（4）为了纯化获得的H细菌，在微生物的实验室培养过程中，关键是无菌操作；实验结束，为避免微生物污染环境和操作者，使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉。

12.工业上常用酵母菌来改善酿造酱油的风味，在稀释发酵阶段，由于添加了较多的盐，抑制了大部分微生物的生长，而一些耐盐酵母菌会继续生长，发酵产生乙醇、有机酸等小分子物质，增加酱油的风味。其实验小组从传统发酵酱油中筛选并分离耐盐酵母菌，请回答下列问题：

（1）将酵母菌用于酱油发酵过程中，密封的发酵罐要留有一定的空间，其目的是__________________。

（2）若用牛肉膏蛋白胨培养基培养大肠杆菌，则培养基的pH需要调至__________。实验室对培养基灭菌的常见方法是____________________。

（3）筛选耐盐酵母菌的培养基中需要加入青霉素，其目的是____________________，为了保证筛选出的酵母菌具有耐盐性，培养基中还需要加入_________。酵母菌发酵产生的乙醇与_________（试剂）反应会呈现灰绿色，该反应可用于乙醇的检验。

（4）在对菌液中的耐盐酵母菌进行计数时，一般要将多个稀释倍数的菌液分别涂布在平板上培养，其目的是____________________________________。

【答案】 (1) 为酵母菌提供氧气，以促进酵母菌的繁殖 (2)中性或微碱性 高压蒸汽灭菌法 (3)抑制细菌的繁殖 一定浓度的食盐溶液 酸性重铬酸钾 (4) 保证能从中筛选出菌落数在30〜300的平板进行计数

【解析】（1）将酵母菌用于酱油发酵过程中，密封的发酵罐留有一定的空间，可以为酵母菌提供氧气，促进酵母菌的繁殖，使发酵后期有较多的酵母菌参与无氧呼吸。

（2）大肠杆菌适宜的培养基pH应为中性或微碱性。实验室常用高压蒸汽灭菌法进行培养基灭菌。

（3）青霉素可以抑制细菌的繁殖。筛选耐盐性的酵母菌，培养基中应加入一定浓度的食盐溶液。酸化的重铬酸钾溶液与乙醇反应会呈现灰绿色，可用于乙醇的检验。

（4）在对菌液中的耐盐酵母菌进行计数时，需要从涂布平板中筛选菌落数在30〜300的平板进行计数，所以要将多个稀释倍数的菌液分别涂布在平板上培养。