甘肃农业科技２０１０年 第５期 Ｇａｎ￥１１，Ａｇｒ．Ｓｃｉ．ａｎｄ Ｔｅｃｈｎ． Ｎｏ．５ ２０１０ １９ 液态肥料中氨基酸态氮两种测定方法比较 陶海霞，史久英，水蓉，王荣德 （甘肃省农业科学院畜草与绿色农业研究所，甘肃 兰州 ７３００７０） 摘要：采用甲醛一指示剂滴定法、甲醛一电极法测定液态肥料中的氨基酸态氮。结果表明，两种方法均适合 于液态肥料中氨基酸态氮的测定，其中甲醛一电极法重复性试验标准偏差为０．０１３ ０，变异系数为１．３２０％，平均 回收率为９９．２５％，回收率标准偏差为０．９７８ ０，变异系数为０．９８５％，均小于甲醛一指示剂法的相应参数，表明甲 醛一电极法检测精度高于甲醛一指示剂法。甲醛用量以１Ｏ．０ ｍＬ为宜。 关键词：液态肥料；氨基酸态氮；测定方法；比较 中图分类号：Ｓ１３２；Ｓ１４５．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—１４６３（２０１０）０５—００１９—０３ Ｔｈｅ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｔｗｏ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｉｎ Ｌｉｑｕｉｄ Ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ ＴＡＯ Ｈａｉ－ｘｉａ，ＳＨＩ Ｊｉｕ－ｙｉｎｇ，ＳＨＵＩ Ｒｏｎｇ，ＷＡＮＧ Ｒｏｎｇ－ｄｅ （Ｉｎｓｉｔｔｕｔｅ ｏｆ Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ Ｇｒａｓｓ ａｎｄ Ｇｒｅｅｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｇａｎｓｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｌａｎｚｈｏｕ Ｇａｎｓｕ ７３００７０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ ｍｅｔｈｏｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｉｎ ｌｉｑｕｉｄ ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｂｏｔｈ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｌｉｑｕｉｄ ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｉｔｒｏｇｅｎ，ｍｅａｎｗｈｉｌｅ， ｕｓｉｎｇ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ ｍｅｔｈｏｄ，ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ ｗａｓ ０．０１３ ０，ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｗａｓ １．３２０％，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９９．２５％，ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ０．９７８ ０，ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔｆ ｏｆ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｗａｓ ０．９８５％，ｔｈｅｓｅ ｄａｔａ ｗｅｒｅ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｆ ｕｓｉｎｇ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ ｍｅｔｈｏｄ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ，ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｃｃｕｒａｃｙ ｏｆ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｏｆ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ ｍｅｔｈｏｄ．Ｓｕｉｔａｂｌｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ Ｗａｓ １０．０ ｍＬ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｌｉｑｕｉｄ ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ；Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｉｔｒｏｇｅｎ；Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ；Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ 液态肥料已被广泛应用于农业生产中，其中 的氮素部分以氨基酸态氮的形式存在，极易被作 物吸收利用。目前氨基酸态氮的测定方法有甲醛 定量法［１］、全自动凯氏定氮仪法 、分光光度法 供参考依据。 １材料与方法 １．１供试液肥及设备、试剂 供试液肥由植物残体发酵生成。采用设备为 ｐＨＳ一２５型酸度计（上海精密科学仪器公司），万分 之一电子天平（瑞士Ｓｔａｒｔｏｒｉｕｓ）。供试试剂主要为 等，其中全自动定氮仪法和分光光度法均需要较 高的检测成本，甲醛定量法具有低成本和简便快 速的特点。但液态肥料中氨基酸态氮如何测定， 尚无明确的检测标准，为此，甘肃省农业科学院 畜草与绿色农业研究所农业环境资源检测研究室 对液态肥料中氨基酸态氮，分别采用甲醛一电极 法、甲醛一指示剂法进行了测定，分析比较了其 ３７％ ４０％甲醛溶液，０．０５ ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠标准滴 定液。 １．２赖氨酸标准溶液和液态肥待测液的制备 准确称取温度在１００ ｏＣ下烘干的赖氨酸０．１９１ ５ ｇ，置于１ ０００ｍＬ容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度， 摇匀贮于４℃冰箱中。该溶液含氮１ ０００ Ｌ，使 测定结果，以期为液态肥料中氨基酸态氮测定提 收稿日期：２０１０—０３—１６ 作者简介：陶海霞（１９８１一），女，甘肃白银人，助理实验师，主要从事农业环境资源检测工作。联系电话：（０９３１） ７６５０３７５。 ２０ 甘肃农业科技２０１０年 第５期 Ｇａｒｔｓｕ Ａｇｒ．Ｓｃｉ．ａｎｄ Ｔｅｃｈｎ． Ｎｏ．５ ２０１０ 用时用蒸馏水稀释成含氮为１００ ｐ，ｇ／ｍＬ的标准工作 液。 准滴定溶液继续滴定至ｐＨ ９．２，记下消耗氢氧化 钠标准滴定溶液的毫升数。同时取４０ ｍＬ水，先 用氢氧化钠溶液调节ｐＨ至８．２，再加入１Ｏ．００ ｍＬ 将待测液态肥料摇匀后，直接吸取１０ ｍＬ于 １００ ｍＬ容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀待测。 １．３ 甲醛一电极法 甲醛溶液，用氢氧化钠标准滴定液滴定至ｐＨ ９．２， 同时做空白试验。 １．７重现性实验 吸取液肥待测液１Ｏ．００ ｍＬ置于１５０ ｍＬ烧杯 中，加水３０ ｍＬ，开动磁力搅拌器，用Ｏ．０５ ｍｏｌ／Ｌ 氢氧化钠标准溶液滴定至ｐＨ为８．２时，记录氢氧 化钠溶液滴定毫升数，计算总酸含量。然后再加 人一定量的甲醛溶液，混匀。再用Ｏ．０５ ｍｏｌ／Ｌ氢氧 用移液管准确吸取１Ｏ．００ ｍＬ赖氨酸标准工作 溶液５份，分别于１５０ ｍＬ烧杯中，按１．３、１．４的 方法进行氨基酸态氮含量检测。根据检测结果计 算相对标准偏差。 １．８加标回收率实验 化钠标准滴定液继续滴定至ｐＨ９．２，记录氢氧化钠 标准溶液消耗的毫升数。同时做空白试验。 １．４甲醛一指示剂滴定法 吸取含氨基酸态氮０．１２７ ｇ／１００ ｍＬ的供试溶液 ５份，分别加入５．００、１Ｏ．ｏ０、１５．０ｏ、２０．００、２５。ｏ０ 吸取液肥待测液１０．０ｍＬ置于１５０ｍＬ烧杯中， ｍＬ赖氨酸标准工作液，按１．３、１．４节的方法进行 检测，计算氨基酸态氮含量，并按下面公式计算 加标回收率。 加３０ ｍＬ水，再加入４滴酚酞指示剂，开动磁力 搅拌器，用０．０５ ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠标准溶液滴定至溶 液初显粉红色时停止，记录氢氧化钠标准溶液滴 定毫升数，计算总酸含量。再加人一定量甲醛溶 液和４滴百里草酚蓝指示剂混匀。用０．０５ ｍｏｌ／Ｌ氢 回收率（％）＝［（混合后测得氨基酸态氮含量一样 品中氨基酸态氮含量）／赖氨酸标准试剂加入量］× １００％ 氧化钠标准溶液滴定至溶液呈蓝紫色时停止，记 录氢氧化钠标准溶液消耗的毫升数。同时做空白 试验。 １．５两种检测方法的比较 ２结果与分析 ２．１ 两种检测方法的测定结果比较 由表１可知，两种检测方法测定结果平均值 符合精度要求（同一样品平行实验的测定差不得超 对两种方法的测定结果计算平均值、平行测 定标准偏差（ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ，ＲＳＤ）和变异 系数（ＣＶ），以比较两种方法。 １．６甲醛用量的确定 过Ｏ．０３ ｇ／ｌＯＯ ｍＬ）［１］，标准偏差和变异系数均符合 检测要求［ ，但甲醛一指示剂法标准偏差和变异 系数均大于甲醛一电极法，这主要是由于酚酞和 百里草酚蓝指示剂指示变色范围较宽，影响了滴 定终点的准确判定。 ２．２甲醛用量 准确吸取１０ ｍＬ标准工作液７份，分别置于 １５０ ｍＬ烧杯中，加水３０ ｍＬ，开动磁力搅拌器， 用０．０５ ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠标准溶液滴定至溶液ｐＨ为 ８．２＇记录氢氧化钠标准溶液消耗的毫升数，计算 总酸含量。在７个烧杯中分别加入４．０ ｍＬ、６．０ ｍＬ、８．０ ｍＬ、１０．０ ｍＬ、１２．０ ｍＬ、１４．０ ｍＬ、１６．０ 从图１可以看出，随着甲醛用量的增加氨基 酸态氮含量的测定结果呈抛物线趋势。当甲醛用 量为１０．０ ｍＬ时氨基酸态氮含量的测定值最高，此 后随着甲醛用量的增加，氨基酸态氮含量反而下 ｍＬ甲醛溶液，混匀。再用０．０５ ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠标 降。因此加入１Ｏ．０ ｍＬ甲醛就完全可以检测出氨基 表１两种检测方法的测定结果 一ｒＩｇ８＇【／暑一卿如 镫郴］蓍 甘肃农业科技２０１０年 第５期 Ｇａｎｓｕ Ａｇｒ．Ｓｃｉ．ａｎｄ Ｔｅｃｈｎ． ４ ２ ｌ ８ ６Ｎｏ．５ ２０１０ 吣 嘶 ４ ２ ０ 眦 。 ２１ 表３加标回收率实验结果 为２．７４３％。表明两种方法的准确度均较高，且以甲 醛一电极法加标回收率各项指标均好于甲醛一指示 剂滴定法。 ３小结 用两种方法测定液态肥料中氨基酸态氮的实 验结果表明，甲醛一指示剂法和甲醛一电极法两 种方法均适合于液态肥料中氨基酸态氮的测定， 甲醛用量以为１０．０ ｍＬ为实，其中甲醛一电极法重 复性标准偏差为０．０１３ ０，变异系数为１．３２０％，平 Ｏ．０ ５．Ｏ １Ｏ．Ｏ １５．０ 均回收率为９９．２５％，回收率标准偏差为０．９７８ ０， 甲醛（ｍＬ） 变异系数为０．９８５％，均小于甲醛一指示剂法的相 应参数，表明甲醛一电极法检测精度高于甲醛一 图１不同甲醛用量氨基酸态氮含量变化 指示剂法。因此，液态肥料中氨基酸态氮的测定 而言，在精度要求较高时应采用甲醛一电极法较 酸态氮的含量。 宜。 ２－３重现性实验 参考文献： 对两种方法进行重演性实验，结果（表２）表 ［１］ 石家庄珍极酿造集团有限公司．ＧＢ １８１８６—２０００酿造 明，两种测定方法的标准差均小于０．０５，变异系 酱油［Ｓ］．北京：中国农业出版社，２００１． 数小，分别为１．３２０％、３．２２７％，甲醛一电极法的 ［２］北京市卫生防疫站，邯郸市卫生防疫站，唐山市卫生 标准差和变异系数均小于甲醛一指示剂法。这表 防疫站．ＧＢ／Ｔ５００９．３９—２００３酱油卫生标准分析方法 明两种检测方法重复性好，所得实验结果可靠。 ［Ｓ］．北京：中国标准出版社出版，２００４． ２．４ 加标回收率实验 ［３］熊芳，易伟亮，戴华．用全自动凯氏定氮仪测定酱油 从表３可知，甲醛一电极法加标回收率平均 中胺盐含量［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００２，２（１２）： 为９９．２５％，回收率变幅为９８．００％ １００．６７％，标 １９８． 准差为０．９７８ ０，变异系数为０．９８５％；甲醛一指示 ［４］夏玉华．化验员实用手册［Ｍ］．北京：化学工业出版社， 】９９９． 剂滴定法加标回收率平均为９８．５４％，回收率变幅 为９４．００％一１０１．００％，标准差为２．７０３ ３，变异系数 （本文责编：张雪琴）
