特效筋骨痛胶囊中掺布洛芬与对乙酰氨基酚的测定

第ｌ３卷第３期　Ｖ０１．１３　Ｎｏ．３　中医药导报　２００７年３月　Ｍａｒｃｈ．２００７　Ｇｕｉｄｉｎｇ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＴＣＭ　特效筋骨痛胶囊中掺布洛芬与对乙酰氨　基酚的测定　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｂｕｐｒｏｆｅｎ　ａｎｄ　Ｐａｒａｃｅｔａｍｏｌ　ｉｎ　Ｔｅｘｉａｏｊｉｎｇｕｔｏｎｇ　Ｃａｐｓｕｌｅ　欧阳春华　（株洲市药品检验所，湖南株洲４１２００８）　【摘要］　目的：对特效筋骨痛胶囊中违法添加布洛芬与对乙酰氨基酚成分进行确认。方法：采用薄层色谱法及高效液相　色谱二极管陈列检测法分别对布洛芬与对乙酰氨基酚进行定性鉴别；参照《中国药典》有关条件，采用ＨＰＬＣ法分别对伪品中　布洛芬与对乙酰氨基酚进行含量测定。结果：样品中检出布洛芬与对乙酰氨基酚含量值分别为０．３４１　ｍｇ／粒；１７．４ｍｇ／粒。结　论：特效筋骨痛胶囊中确认违法添加了布洛芬与对乙酰氨基酚成分。　［关键词］　特效筋骨痛胶囊；布洛芬；对乙酰氨基酚；ＴＬＣ；ＨＰＬＣ—ＤＡＤ　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｃｏｎｆｉｒｍ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｏｆ　ｉｂｕｐｒｏｆｅｎ　ａｎｄ　ｐａｒａｃｅｔａｍｏｌ　ｉｌｌｅｇａｌｌｙ　ａｄｄｉｎｇ　ｉｎ　Ｔｅｘｉａｏｊｉｎｇｍｏｎｇ　ｃａｐｓ．Ｉｔ．　Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ　ＴＬＣ　ａｎｄ　ＨＰＬＣ—ＤＡＤ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｂｕｐｒｏｆｅｎ　ａｎｄ　ｐａｒａｃｅｔａｍｏｌ　ｉｎ　ｑｕａｌｉｔｙ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，ＨＰＬＣ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｂｕｐｒｏｆｅｎ　ａｎｄ　ｐａｒａｃｅｔａｍｏｌ　ｉｎ　ｓｐｕｒｉｏｕｓ　ｂｒｅｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｂｕｐｒｏｆｅｎ　ａｎｄ　ｐａｒａｃ—　ｅｔａｍｏｌ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｏｕｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｐ￣ｓ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　０．３４１　ｍｇ　ｅｖｅｒｙ　ｐｉｌｌ　ａｎｄ　１７．４　ｍｇ　ｅｖｅｒｙ　ｐｉｌｌ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｔ　ｉｓ　ｃｏｎｆｉｍｅｄｒ　ｔｈａｔ　ｂｕｐｒｆｏｅｎ　ａｎｄ　ｐａｒａｃｅｔａｍｏｌ　ａｒｅ　ａｄｄｅｄ　ｉｎｔｏ　Ｔｅｘｉａｏｊｉｎｇｇｕｔｏｎｇ　ｃａｐｓｌｅ　ｕｉｌｌｅｇａｌｌｙ．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］Ｔｃｘｉａｏｊｉｎｇｕｔｏｎｇ　ｃａｐｓｕｌｅ；Ｂｕｐｒｏｆｅｎ；Ｐａｒａｃｅｔａｍｏｌ；ＴＬＣ；ＨＰＬＣ—ＤＡＤ　［中图分类号］Ｒ９２７．２［文献标识码］Ａ［文章编号］１６７２—９５１ｘ（２００７）０３—００７６—０３　特效筋骨痛胶囊说明书标明由当归、红花、马钱子、草乌　自制成阴性对照样品，取３粒内容物，同法制成阴性对照样　品溶液。另取布洛芬对照品。加甲醇制成每ｌ　ｎｄ含ｌ　ｍｇ的　溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取　卜述溶液　（制）等中药组成，为一种祛风活血、舒筋止痛的纯中药制剂。　经群众举报，我所对该药进行补充检验。对其进行解热镇痛　西药成分的排查，发现其中违法添加了布洛芬与对乙酰氨基　酚等成分。　１仪器与试药　各５　，分别点样于同一硅胶Ｇ薄层板上，以正己烷一乙酸　乙酯一冰醋酸（１５：５：１）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以　含１％高锰酸钾的稀硫酸溶液，１２０℃加热２０　ｍｉｎ后置紫外　光灯（３６５　ｎｍ）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应　的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照样品色谱中，在与对　照品色谱相应的位置上无斑点。结果表明，样品中可能添加　了布洛芬。　２．１．２　ＨＰＬＣ法和结果　１．１仪器ＬＣ一１０ＡＴｖｐ二元高压梯度高效液相色谱仪：　ＳＰＤ—Ｍ１０Ａｖｐ二极管阵列检测器；ＬＣ—Ｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱工作站　（日本岛津公司）；ＡＧ一１３５电子天平（瑞士Ｍｅｔｔｌｅｒ公司）；　ＫＱ一５０型超声波清洗器（昆山市超声波仪器厂）；ＵＶ一１型　三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂）。　１．２试刺与试药特效筋骨痛（河北德生堂药业有限公司　生产，批号：０５０８０６）；布洛芬对照品（中国药品生物制品检定　２．１．２．１　色谱条件　色谱柱：Ｓｈｉｍ—ｐａｃｋ　ＶＰ—ＯＩ）Ｓ，　（１５０　ａｍ×４．６　ａｍ）日本岛津公司；流动相：以醋酸钠缓冲液　所提供，批号：１００１７９—２００３０３）；对乙酰氨基酚对照品（中国　药品生物制品检定所提供，批号：１０００１８—２００４０３）；其他试　剂均为分析纯。　２方法和结果　２．１布洛芬　（取醋酸钠６．１３　ｇ，加水７５０　ｍｌ，振摇使溶解，用冰醋酸调节　ｐＨ值至２．５）一乙腈（６０：４０）；检测波长：２６３　ａｍ；流速：１．０　ｍｌｆｍｉｎ；柱温：３０℃；进样量：２０　。　２．１．２．２　对照品溶液的的制备　取布洛芬对照品适量，精　密称定，加甲醇制成每１　ｍｌ含０．５　ｍｇ的溶液，作为对照品溶　取样品３粒，倾出内容物，加氯仿　液。　２．１．１　ＴＩＥ法和结果２０　ｍｌ，超声处理３０　ｍｉｎ，滤过，滤液蒸干，加甲醇１　ｍｌ使溶　２．１．２．３供试品溶液的制备取６粒内容物，研细，加氯仿　解，作为供试品溶液。另取当归、红花、马钱子等中药材等量　７６　３０　ｍｌ超声处理５　ｍｉｎ，滤过，滤液用１０％碳酸钠溶液提取５　维普资讯 http://www.cqvip.com

第ｌ３卷第３期　ＶｏＩ．１３　Ｎｏ．３　中医药导报　２００７年３月　Ｍａｒｃｈ．２００７　Ｇｕｉｄｉｎｇ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＴＣＭ　次（每次３０　ｒＩｌ１），水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至５０　ｒＩｌｌ，　摇匀，用０．４５　ｍ微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。　２．１．２．４阴性对照样品溶液的制备２．１．２．５样品测定取自制阴性对照样品　６粒内容物，同２．１．２．３法制成阴性对照样品溶液。　分别精密吸取对照品和供试品溶液各　入布洛芬对照品溶液５　ｒＩｌｌ，按样品测定项下方法测定，结果　平均回收率为９８．９％，ＲＳＤ＝１．３％（ｎ＝５）。（见表１）　表１　布洛芬回收率试验表　２０　，注入液相色谱仪，记录色谱图及色谱峰２００—４００　ｎｍ　波长范围内的吸收光谱。结果批号０５０８０６供试品色谱中，　出现与布洛芬对照品色谱保留时间相同的色谱峰；且在２００　—４００　ｎｌ／ｌ波长范围与布洛芬对照品显相一致的吸收光谱；阴　性对照样品色谱中，未出现与布洛芬对照品色谱保留时间相　同的色谱峰。并通过计算得出样品中含布洛芬的含量为　０．３４１　ｍｇ　／　ｆ见罔１～３）　图　２６３　Ｉｌｌｌｌ测定的阴性对照样品图　图３　２６３ｎｍ测定的布洛芬对照品图　２．１．２．６线性关系　精密吸取对照品溶液１．０，２．０，３．０，　４．０，５．０，６．０　ｍｌ置１０　ｍ１　瓶中，用甲醇稀释　刻度，摇匀，　进样２０　，按上述色谱条件测定峰面积，以布洛芬浓度对峰　面积进行线性回归，得回归方程Ａ＝一０．０１７４＋３９．７５３Ｃ，　＝０．９９９９，布洛芬在４０—２４０　ＩＴＩｌ之间呈良好线性关系。　２．１．２．７精密度试验取同一份对照溶液在上述色谱条件　下，重复进样５次，以峰面积计，ＲＳＤ为０．５４％（ｎ＝５）。　２．１．２．８重复性试验按样品测定方法操作，用本方法对　同一份样品进行测定，并计算含量，ＲＳＤ为０．９７％（ｎ＝６）。　２．１．２．９回收率试验取样品ｌ０粒，内容物研细混匀。精　密称取细粉适量（约相当于０．３　ｇ）置５０　ＩＴＩｌ量瓶中　精密加　２．２对乙酰氨基酚　２．１．１　ＴＬＣ法和结果　取样品３粒．倾出内容物，加乙醇　２０　ｍｌ，超声处理３０　ｍｉｎ，滤过，滤液蒸干，加乙醇１　ｍｌ使溶　解，作为供试品溶液。另取自制阴性对照样品３粒内容物，　同法制成阴性对照样品溶液。另取对乙酰氨基酚对照品，加　甲醇制成每１　ｍｌ含２　ｍｇ的溶液，作为对照品溶液。照薄层　色谱法试验，吸取上述溶液各５　，分别点样于同一硅胶　ＧＦ２５４薄层板上，以三氯甲烷一丙酮一甲苯（１３－５－２）为展　开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（２５４　ｎｌ／１）下检视。供试　品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑　点，对照样品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上无斑点。　结果表明，样品中可能添加了对乙酰氨基酚。　２．２．２　ＨＰＬＣ法和结果　２．２．２．１　色谱条件　色谱柱：Ｓｈｉｍ—ｐａｃｋ　ＶＰ—ＯＤＳ，　（１５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ）日本岛津公司：流动相：甲醇一水一磷酸　（２２：７８：０．１）；检测波长：２４９　ｎｍ；流速：１．０　ｍｌ／ｍｉｎ；柱温：　３０℃；进样量：５　。　２．２．２．２对照品溶液的的制备　取对乙酰氨基酚对照品适　量，精密称定，加甲醇制成每１　ｍｌ含０．４　ｍｇ的溶液，作为对　照品溶液。　２．２．２．３供试品溶液的制备取６粒内容物，研细，加氯仿　３０　ｍｌ超声处理５　ｍｉｎ，滤过，滤液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解　并定容至２５０　ｍｌ，摇匀，用０．４５　ｍ微孔滤膜滤过，取续滤液　作为供试品溶液　２．２．２．４阴性对照样品溶液的制备取自制阴　埘！！（ｉ样＾＾　６粒内容物，同２．２．２．３法制成ｌ；月性对照样品溶液　２．２．２．５样品测定分别精密吸取对照品和供试品溶液各　５　，注入液相色谱仪，记录色谱图及色谱峰２００—４００　ａｍ波　长范围内的吸收光谱。结果批号０５０８０６供试品色谱中，出　现与对乙酰氨基酚对照品色谱保留时间相同的色谱峰；且在　２００—４００　ａｍ波长范围与对乙酰氨基酚对照品显相一致的吸　收光谱；对照样品色谱中，未出现与对乙酰氨基酚对照品色　谱保留时间相同的色谱峰。并通过计算得出样品中含对乙　酰氨基酚的含量为１７．４　ｍ　粒　（见图４—６）　７７　维普资讯 http://www.cqvip.com

第ｌ３卷第３期　Ｖｏｌ＿ｌ３　Ｎｏ．３　中医药导报　２００７年３月　Ｍａｒｃｈ．２００７　Ｇｕｉｄｉｎｇ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＴＣＭ　定，结果平均回收率为９９．３％，ＲＳＤ＝０．７７％（ｎ＝５）。（见表　２）　３讨　论　接群众举报，由河北德生堂药业有限公司生产的“特效　筋骨痛”的活血止痛效果特好，有违法添加西药解热镇痛类　成分的嫌疑；经过排查，违法添加了布洛芬与对乙酰氨基酚　等西药成分。　图４　２４ｔ）ｌｌｌｌｌ测定的对乙酰氨基酚图　～一一　一　…一　薯～藏　嘲嗽　因本文采用二极管阵列检测器（ＤＡＤ），对布洛芬对照品　色谱峰进行扫描，记录２００—４００　ａｍ波长范围的吸收光谱，　根据记录的吸收光谱，布洛芬在波长（２６３±２）１１１１１处有最大　吸收，同时参照《中国药典》”　２００５年版（二部）布洛芬缓释　胶囊的含量测定方法，将布洛芬检测波长定为２６３　ａｍ。　因本文采用二极管阵列检测器（ＤＡＤ），对对乙酰氨基酚　峨　ｌ｜　毫　ｔ｜｜　｜　。　Ｉ誓。－～　一　ｌ　。。ｌ毫｜　。≯　、　ｊ　■　、　，　对照品色谱峰进行扫描，记录２００—４Ｏ０　ａｍ波长范围的吸收　光谱，根据记录的吸收光谱，对乙酰氨基酚波长（２４５　４－２）ａｍ　处有最大吸收，同时参照《中国药典》…２００５年版（二部）对　乙酰氨基酚凝胶剂的含量测定方法，将检测波长定为　２４９　ａｍ。　布洛芬为异丁苯丙酸，故氯仿提取液采用１０％碳酸钠试　液萃取，减少样品中杂质干扰　表２对乙酰氨基酚回收率试验表　图６　２４９ｎｍ测定的样品图　２．２．２．６线性关系精密吸取对照品溶液１．０，３．０，５．０，　８．０　ｆｒＩｌ，１０．０　ｍｌ置５Ｏ　ｍｌ量瓶中，用甲醇稀释到刻度，摇匀，　进样５　，按上述色谱条件测定峰面积，以对乙酰氨基酚浓　度对峰面积进行线性回归，得回归方程Ａ＝４１７４６．８９　Ｃ＋　８９７５３．２０，　＝０．９９９９，对乙酰氨基酚在２０～２００　ｇ／，ｍｌ之间　呈良好线性关系。　２．２．２．７精密度试验取同一份对照溶液在上述色谱条件　下，重复进样５次，以峰面积计，ＲＳＤ为０．４３％（ｎ＝５）。　２．２．２．８重复性试验２．２．２．９回收率试验按样品测定方法操作，用本方法对　取样品ｌ０粒，内容物研细混匀。精　参考文献：　［１］国家药典委员会．《中华人民共和国药典》（二部）［Ｓ］．　北京：化学工业出版社，２００５：９７，１７４　（收稿日期：２００６—０７—１６编辑：李海洋）　同一份样品进行测定，并计算含量，ＲＳＤ为０．７５％（ｎ＝６）　密称取细粉适量（约相当于０．３　ｇ）置５０　ｒｒＩｌ量瓶中。精密加　入对乙酰氨基酚对照品溶液５　ｍｌ，按样品测定项下方法测’　（上接第６６页）要，有利于从认识、感觉、情绪、态度和行为　向４，ＪＬ及其家属介绍手术的大概情况，以热情的服务赢得他　通过与之交谈，了解其心理疑虑，用疏导法及现身　等方面调动手术患儿的主观能动性，使手术中４，Ｊｒ，情绪稳　们的信任，定，体征正常，并很好地配合手术。因此，术前作好病人的心　说法解除其对手术技术和术者的需求心理，主动向其介绍手　理护理，掌握手术病人的心理规律，解决病人的心理难题，使　术者的医疗水平及手术者曾经做过同类手术　打消４，ＪＬ及　病人处于最佳的心理状态来接受治疗，是确保手术安全顺利　家属客观存在的顾虑，增加其对于术的信心，使小儿　完成的一项十分重要的工作。　术　时更加配合　术中及术后电应向患儿及其家人详细讲解护　（收稿日期：２００６—０９—１９编辑：李海洋）　家属对手术的恐惧心理是普遍存在的，这主要是由于他　理中的注意事项，以利于伤口早目愈合　们对手术缺乏认识所造成的　针对这些情况，术前，护士应　７８