维普资讯 http://www.cqvip.com 安徽农业科学，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＡｎｈｕｉ ａｇｉｆ．Ｓｃｉ．２００８，３６（１５）：６１５１—６１５３ 责任编辑孙红忠责任校对卢瑶 紫外分光光度法测定海产品中的硒 叶林，包晓丽，张虹 （浙江工商大学食品与生物工程学院，浙江 Ｈ ３１００３５） 摘要建立了一种海产品中硒的分析方法。以４一硝基邻苯二胺为衍生剂，在ｐＨ值２．０、２０ ｑＣ下反应５０ｍｉｎ，使ｓｅ４ 与 硝基邻苯二胺反 应生成苤硒脑，反应后用甲苯萃取，用紫外分光光度计在波长３４９．５ Ｄ／ｎ下测定吸光值。该方法在硒浓度１～１０ Ｗ：／ｍｌ范围内线性关系良 好（ｒ ＝０．９９７ ８），检测限为０．６ ，麟Ｄ为１．３３％。用该方法测定海产品中的硒，操作简便，成本低廉，可满足各类海产品中硒的含量 测定。 关键词紫外分光光度法；海产品；硒；含量测定 中图分类号￥９１２ 文献标识码Ａ 文章编号０５１７—６６１１（２０ｏ８）ｌ５—０６１５１—０３ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｅｌｅｎｉｍｎ ｉｎ Ｓｅａｆｏｏｄ ｗｉｔｈ ＵＶ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ＹＥ ＩＡｎ ｅｔ ａｌ（Ｃｏ￣ｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｇｏｎｇｓｈａｎｇ Ｕ ｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ ３１００３５） Ａｂｓｔｒ￣－ｔ Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ｒ衄ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｌｅｎｉｕｍ．１’ｈｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ４－ｎｉｔｒｏ－ｏ－ｐｈｅｎｙｌｅｎｄｉａｍｉｎｅ（ＮＰＤＡ） ｎｄ Ｓｅ４ａ ＷａＳ ａｌｌｏｗｅｄ ｔｏ ｓｔａｎｄ ｆｏｒ ５０ ｍｉｌｌ ａｔ ２０ ｏＣ ｗｉｈ ｐＨ ２．０，ｗｈｉｔｃｈ ｍａｄｅ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｉａｚｓｅｌｅｎｏｌｅ． ｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｌ１ｅ ａｂ— ｓｏｒｂａｎｅｅ ｖａｌｕｅｓ ｗｉｈＩⅣｓｔｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ａｔ３４９．５ｒｉｍ ａｆｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈｔｏｌｕｅｎｅ．３Ｎｓｍｅｔｈｏｄｈａｄ ａ ｇｏｏｄ１ｎｉｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ａｔ ａｒａｎｇｅ ｏｆ１～１０Ｗ：／ｍｌ （ｒ ＝０．９９７ ８）． ｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｗａｓ ０．６ ｎｄ ａｎｄ ｆｏｒ ＲＳＤ Ｗａｓ １ ３％． ｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ＵＳｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｉｎ ｓｅａｆｏｏｄｓ． １１ｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｉｔ Ｗａｓ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｌｏｗ ｃｏｓｔ，ａｎｄ Ｃａｎ ｍｅｅｔ ｈｅ ｄｅｔｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｌｅｎｉｍ ｉｕｎ ｓｅａｆｏｏｄｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｕｖ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；Ｓｅａｆｏｏｄ；ＳＣｌｅｎｉｕｍ；Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ 硒是人体１５种必需微量元素之一，具有清除自由基、抗 １．３。２鱼虾类。黄鱼、带鱼、鱿鱼、明虾。将黄鱼、带鱼处理 干净，去皮去骨取其可食部分；将明虾摘去头部，去壳用清水 清洗干净。将处理干净的样品用匀浆器均质备用。 １．３．３贝类。将蛤蛎用清水饲养数日令其充分吐出泥沙， 然后用开水烫泡令贝壳张开，取出软体部，洗去泥沙，滤去水 分，用匀浆器均质备用。 １．４实验方法 衰老、抗肿瘤、抗辐射等作用。海产品中含有丰富的硒，可作 为硒的重要膳食来源。然而硒是一种二重元素ｌ】ｊ，缺硒会使 人体多种组织发生病变，过多可导致急性或慢性硒中毒，因 此研究海产品中硒的分析方法具有非常重要的科学价值。 目前测定食品中的硒主要有原子光谱法、氢化物原子荧 光光谱法、荧光法、分光光度法、动力学分析法和电化学法、 气相色谱法等。其中原子光谱法、氢化物原子荧光光谱法所 １．４．１样品消化方法ｌ５ｊ。称取一定量经预处理的样品（藻 类植物２．０ ｇ，贝类、鱼类５．０ ｇ）于２５０ｍｌ锥形瓶中，加人数粒 需仪器设备昂贵，荧光法所用主要试剂有一定毒性且需要进 口，电化学法、动力学分析法所需温度等条件苛刻ｌ２Ｊ。笔者 采用４一硝基邻苯二胺紫外分光光度法对杭州市场上的几种 海产品硒含量进行测定，取得了满意的结果，与其他方法相 玻璃珠，并加入１０．０ｍｌ混合酸（硝酸：高氯酸＝４：１），冷消化 过夜（１６ ｈ以上）。次日于电炉上加热，视样品是否消化完 全，若混合酸少于２ ｍｌ而样品没有消化完全，则及时补充混 比，该方法具有操作简便、干扰少、操作费用低等优点。 １材料与方法 合酸继续消化。当溶液变为清亮无色并伴有白烟时，继续加 热至剩余体积２ ｍｌ左右（不可蒸干），取下冷却，待冷却后再 加入５ ｍｌ ６ ｍｏｌ／Ｌ ＨＣ１，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有 白烟出现，以完全将６价硒还原为４价硒，冷却，转移至２５ ｍｌ 容量瓶中（测定前定容。视样品消化后溶液中是否有悬浮物 １。１仪器ＵＶ－２５５０紫外分光光度计；ｐＵＳ．３Ｃ精密ＤＨ计（上 海雷磁仪器有限公司）；电子天平［梅特勒一托利多仪器（上 海）有限公司］。 １．２试剂硒标准溶液ｌ３Ｊ：准确称取１．０ ｇ硒粉，用１０ ｍＩ硝 质，如有则须先过滤后再定容），同时作空白实验。 １．４．２测定方法。移取消化液５．０ ｍｌ于５０ ｍｌ比色管中，加 入１．０ ｍｌ ５％ＥＤＴＡ溶液作为掩蔽剂，加水至２５ ｍｌ，用８０％的 甲酸和５０％氨水调节ｐＨ值至２．０，加入１．０ ｍｌ １％ＮＰＤＡ溶 液，于２０ ｏＣ下暗处放置５０ ｍｉｎ后，加入１Ｏ ｍ１甲苯萃取，振摇 酸溶解，水浴加热直到硒粉完全溶解，转移至１ ０００ ｍｌ容量瓶 中，定容制成１ ｍｇ／ｎ￣硒标准工作液，用时逐级稀释成１０、１ 髂／ｍｌ的硒标准液；５％ＥＤＴＡ溶液：称取５．０ ｇ乙二胺四乙 酸二钠，溶解于少量蒸馏水中，加热至乙二胺四乙酸二钠完 全溶解，放热后转移至１００ ｍｌ容量瓶中，定容至１００ ｍｌ；１％ ＮＰＤＡ溶液ｌ４Ｊ：称取１．０ ｇ ４－硝基邻苯二胺，溶于１００ ｍｌ １ ｍｏｌ／Ｌ ＨＣ１溶液中，并以１Ｏ ｍ１甲苯萃取２次，转移至棕色瓶， ４℃保存。以上试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 １．３材料 ５ ｍｉｎ并静置１０ ｍｉｎ，取出甲苯层，倒人１ ｃｍ比色皿中，在波 长３４９．５ ｎｒｎ下测其吸光度 。并根据测得的吸光值在标准 曲线上查出相应的硒含量 ，并计算出样品中的硒含量，公 式如下： ×Ｖ Ａ一５×ｍ ． １．３．１海藻类植物。海带（黄色和黑褐色两个品种）、羊栖 菜用自来水洗净，于６０℃条件下烘干，粉碎备用。 作者简介叶林（１９８５一），男，浙江衢州人，硕士研究生，研究方向：水 产品安全。＊通讯作者，硕士生导师，教授，Ｅ．ｍａｒｌ： ｈｏｎｇｚｈ２３＠２６３．ｎｅｔ。 式中， 为样品中硒含量（／ｗ／ｇ）； 为标准曲线查得的硒含 量（ ）；Ｖ为消化液体积（ｍ１）；ｍ为样品质量（ｇ）。 ２结果与分析 ２．１实验条件的确定 ２．１．１最佳测定的波长。取１０ ／ｍ１硒标准溶液５ ｍ１于３ 收稿日期２００８—０３－２１ 支５０ ｒｎｌ的比色管中，加水至２５ ｍ１，用８０％的甲酸调节ｐＨ值 维普资讯 http://www.cqvip.com ６１５２ 安徽农业科学 ２００８正 至２．０，加入１ ｍｌ １％ＮＰＤＡ溶液，于６０℃水浴中反应６０ ｍｉｎ， 加入１０ ｍ１甲苯振摇５ ｍｉｎ，并静置１０ ｍｉｎ，分层后取出甲苯层 于７支５０ ｍ１比色管中，加水至２５ ｍ１，用８０％的甲酸调节ｐＨ 值至２．０，各加入１％ＮＰＤＡ溶液１ ｍｌ，于６０℃水浴中分别反 应１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０ ｍｉｎ，反应结束后加入１０ ｍ１甲苯振 摇５ ｌＴｌｉｎ，并静置１０ ｍｉｎ，分层后取出甲苯层用紫外分光光度 计在３４９．５ ｎｍ波长下测定吸光值。 由图３可知，吸光值随反应时间的延长而逐渐增大，在 ５０ｌＴｌｉｎ时吸光值最大，然后开始下降，在６０～７０ ｍｉｎ下降缓 慢。故该实验选择反应时问为５０ ｍｉｎ。 倒入１ ｃＩｎ比色皿中，在ＵＶ．２５５０紫外可见分光光度计上从 ２００．０～６００．０ ｎｍ进行波长扫描。结果表明在３００．０～４００．０ ｒｌｒｌｌ处形成完整的波峰，其最大吸收波长为３４９．５ ｒｌｒｌｌ，因此选 择测定波长为３４９．５ ｒｌｒｌｌ。 ２．１．２最佳ｐＨ值的选择。分别取１０ ／ｍ１硒标准溶液３．０ ｍ１于７支５０ ｍ１比色管中，加水至２５ ｍ１，用８０％的甲酸调节 ｐＨ值分别为０．５、１．０、１．５．２．０、２．５、３．０、３．５，各加入１ ｍｌ的 １％ＮＰＤＡ溶液，于６０℃水浴中反应６０ ｍｉｎ后，加入１０ ｍ１甲 苯振摇５ ｌＴｌｉｎ，并静置１０ ｍｉｎ，分层后取出甲苯层用紫外分光 光度计在３４９．５ ｎｍ波长下测定吸光值。结果见图１。从图１ 可看出，在较低酸陛体系中吸光值较小，随着ｐＨ值的增大， 吸光值逐渐增大，在ｐＨ值２．０时达到最大吸收，然后呈平稳 趋势，由图１可见在ｐＨ值２．０～３．５吸光值稳定。所以该实 验选择ＤＨ值为２．０。 喜 鼍 耋 藿 图３反应时间与吸光值曲线 Ｆｉｇ．３ Ｔｈｅ ａ ０ｆ ｒ Ｉｄｉ佃ｔｉｍｅ ａｎｄ ａｂｓｏｒｌ￣ｏｎ ｒａｌｕｅ 喜 耋 暑 ２．１．５最佳反应温度分别取１０￣ｇ／ｍｌ硒标准溶液３．０ ｍｌ 于７支５０ ｍ１比色管中，加水至２５ ｍ１，用８０％的甲酸调节ｐＨ 值至２．０，各加入１％ＮＰＤＡ溶液１ ｍｌ，分别在２０、４０、５０．６０、７０、 ８０、９０℃反应５０ ｍｉｎ后，加入１０ ｍ１甲苯振摇５ ｍｉｎ，并静置１０ ｍｉｎ，分层后取出甲苯层用紫外分光光度计在３４９．５ ｎｉｎ波长 ｐ｝ｌ值ｐＨ ｖａｌｕｅ 萋 图１ ｐＩ｛值与吸光值曲线 Ｆｉｇ．１ Ｔｈｅ ０ｆ ｐＨ ｖａｌｕｅ ａｎｄ曲ｓｏ Ｉｌｅ 下测其吸光值。从图４可看出，反应温度在２０～６０℃，吸光 值较大且稳定，然后吸光值开始下降，至９０℃吸光值骤减。 所以该实验选择反应温度为２０℃。 ２．１．３最佳衍生剂用量。分别取１０￣ｇ／ｍｌ硒标准溶液３．０ ｍ１于７支５０ ｍ１比色管中，加水至２５ ｍ１，用８０％的甲酸调节 ｐＨ值至２．０，分别加入１％ＮＰＤＡ溶液０．２．０．４．０．６．０．８、１．０、 １．２、１．４ ｍｌ，于６０℃水浴中反应６０ ｍｉｎ后，加入１０ ｍ１甲苯振 罢 ； 善 摇５ ｍｉｎ，并静置１０ ｍｉｎ，分层后取出甲苯层用紫外分光光度 计在３４９．５ ｎｉｎ波长下测定吸光值。 耋 迫 由图２可看出，吸光值随着衍生剂用量的增加而逐渐增 大，在１．０～１．４ ｍｌ吸光度较大且稳定，用量为１．２ ｍｌ时吸光 值达到最大，然后呈下降趋势。在该研究中，考虑到实验的 方便性，选择衍生剂用量为１．０ ｍｌ。 图４反应温度与吸光值曲线 Ｆｉｇ・４ １ｈｅ ０ｆｌ＇￣ｄｉｏｎｔ￣ｔｕｒｅ ａｎｄ曲ｓ０ｒｐ ｖａｌｕｅ 温度Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ／／℃ 喜 ２．２工作曲线及方法的检测限与精密度 ２．２．１标准曲线。分别取１０隅／ｍ１硒标准溶液０．０．１．０．２、 ０．４、０．６ ０．８、１．０ ｍｌ于７支５０ ｍ１比色管中，加水至２５ ｍ１，用 鲁 耋 ８０％的甲酸调节ｐＨ值至２．０，各加入１％ＮＰＤＡ溶液１．０ ｍｌ， 在２０℃下暗处放置５０ ｍｉｎ后，加入１０ ｍ１甲苯振摇５ ｌＴｌｉｎ并 静置１０ ｍｉｎ，分层后取出甲苯层用紫外分光光度计在３４９．５ ｎｉｎ波长下测定吸光值，绘制吸光值与硒含量曲线。 衍生剂用量Ⅳｍｌ ￣ｄｉｔｉｏｎ ｑｕａｎｔｉｔｙ ｏｆ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｄｏｓａｇｅ 结果表明，在硒含量１～１０ ，硒含量与吸光值成正比， 其线性方程为Ｙ＝０．０１８ ８ｘ一０．（１０２ ３，回归系数为０．９９７ ８。 ２．２．２精密度。在实验条件下分别取１０ 硒标准溶液 测定吸光值分别为０．５５６、０．５５６、０．５５７、０．５５９．０．５４３、０．５４３，平 均为０．５５２，ＲＳＤ为１．３３％ 图２衍生剂用量与吸光值曲线 ｇ．２ １ｈｅ ０ｆ ｄｅｌｉｖａｆｉｖｅ ｄｏｓａｇｅ ａｎｄ曲ｓ０ ｖａｌｕｅ ２．１．４最佳反应时间。分别取１０偿／ｍ】硒标准溶液３．０ ｍｌ 维普资讯 http://www.cqvip.com ３６卷１５期 叶林等紫外分光光度法测定海产品中的硒 ６１５３ ２．２．３检测限。在实验条件下分别取１￣ｇ／ｍｌ的硒工作液 测其吸光值，见表１。结果表明，检测限为０．６￣ｇ／ｒｒａ。 表１检测限实验 ３１￣ｔｂｌｅ １ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔ ｅｘｐｅｒｉｍ￣ａｔ 含硒情况为：韭菜０．２３１ ｇ，藕０．０２２ ｇ，土豆０．０１５ ｇ， 玉米０．０２０ ｇ，大米０．ｃｒ７３ ｇ，与表２比较可见，海产品中 的硒含量均高于蔬菜、谷类。 由分析结果可知，海产品是富硒的天然食物，可作为硒 硒含量∥ ０ ０．２ ０．４ 吸光值 ０ —０．００４ ５ —０．００５ ０ ５ 硒含量∥腭 Ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｅｏｒＪｔｅｎｔ ０．６ Ｏ．８ １．０ 吸光值Ａ３４９ ５ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｖａｌｕｅ ０．００３ ５ ０．０１４ ５ ０．０１６ ５ Ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｃｏｎｔｅｎｔ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｖａｌｕｅ 的重要膳食来源。 ２．４干扰与消除紫外分光光度法测定海产品中的硒有２ 个可能的干扰来源：一是由于消化酸残液与邻苯二胺试剂反 应而被甲苯萃取出造成吸光值的增大；另一方面，消化液中 存在的Ｆｌｅ３＋、 ¨、Ｉ一对硒的测定有干扰。为消除干扰，在消 化时，应尽量使混合酸完全分解蒸至体积约为２ ｍｌ，尽可能 降低干扰；另外，对于Ｆｌｅ３ 等于扰离子，可在反应体系中加入 １ ｍｌ ５％的Ｅ １Ａ溶液作掩蔽剂。 ２．３样品分析结果表２为在杭州市场所购的海带、蛤蛎、 带鱼等几种海产品中总硒含量的测定结果。 表２几种海产品中总硒含量的测定结果 ３１￣ｂｔｌｅ ２ Ｄｅｔｅ￣ｌｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆｔｏｔａｌ ｓｄｅｒ￣ｍ ｃｏｎｔｅｎ￣ｉｎ ｓｅｖｅｒａｌ ｓｅａｆｏｏｄｓ ３结论 研究表明，在酸性条件下，以 硝基邻苯二胺为衍生剂， 用紫外分光光度法测定海产品中的硒，该法具有操作简便、 花费少、校准曲线关系良好等优点，可用于一般海产品中硒 的含量分析。 参考文献 ［１］郑文杰，唐全民，白燕，等．生物样品中微量元素硒的测定研究进展 ［Ｊ］．广州化工，２００３，３１（２）：２６—２９． ［２］朱玲，高向阳，王金鹏，微波高压快速消解一紫外分光光度法测定南 阳彩色，ｊ、麦中的微量元素硒［Ｊ］．安徽农业科学，２０Ｏ６，３４（ ）：６０９３— ６Ｏ９７． ［３］吴凤山，吴涤，光度法测定黑木耳中微量硒¨Ｊ］．光谱实验室，２０Ｏ４，２１ （４）：７１９—７２１． 由表２可看出，蛤蛎中的硒含量最高，其次为带鱼，黄鱼 和鱿鱼硒含量相同，藻类植物较低。另据报道，蔬菜、谷类的 （上接第６１４２页） Ｅ４］肖上甲，黄薇．微波消解一气相色谱法测定化妆品中硒［Ｊ］．微量元素 与健康研究，２０Ｏ４，２１（１）：４４－４５． ［５］魏广东．水产品质量安全检验手册［Ｍ］．北京：中国标准出版社，２Ｏ晒： ４２７一 ． 的重要条件。 时数，牧草生长期４～９月各月的降水量，４月均温，年平均温 度一般密切。 表２比较数列对参考数列的关联度及关联序 ～（２）在温度因子与牧草产量的关联分析中，牧草生长期 ９月的均温，４—９月≥０℃的积温，６、７、８月的温度与牧草 ０．９２８ ３、３＇１＝０．９２５ ２、 ＝０．９１９ ３。因此，６、７、８月温度的 产量的关联度较大，分别为 ＝０．９３１ １、 ＝０．９２９ ２、 ＝数列号 关联度ｒ／ 关联序 数列号 关联度 ０．９２５ ２ Ｘ２ ０．８９７ ３ ０．８７９ ３ ０．９１６ ８ ０．９２９ ２ ％ｘ，７ ８ ０．９１９ ３ ０．９２８ ３ ０．９１４ ４ ０．９３１ １ Ｘｌ０ ｌ１ ＸＩ２ ３ ０．９１３ ３ ０．６７３ ９ ０．８０３ １ ０．８７７ １ ６ １７ １９ １０ ３ ９ ４ １２ ２ １３ ２５ ２３ ２０ 】４ １５ １６ １７ ｘ１８ ｌ９ ∞Ｘ２１ Ｘ２２ Ｘ２３ ２４ ｘ２５ ０．８５０ ８ ０．８５１ ２ ０．７８８ ０ ０．９１６ ５ ０．９３３ ９ ０．９２２ ６ ０．９１９ ７ ０．８９７ ６ ０．８９７ ０ ０．９１３ ０ ０．９１３ １ ０．９２８ ０ 关联序 ２２ ２１ ２４ １１ １ ７ ８ １６ １８ １５ １４ ５ ～高低，决定该年度天然草地牧草产量的丰、欠。 （３）在水分因子与牧草产量的关联分析中，牧草生长期４ ９月的降水量和年降水量与牧草产量的关联度较大，分别 为 ＝０．９１６ ５、Ｙｌｏ＝０．９１３ ３。在共和县，每年的年降水量在 ２００～４ＯＯ ｉ＇ｎＩｎ，平均在３１５唧左右，且牧草返青开始至成熟的 ４～９月间，降水量占年降水量的７０％左右，基本能满足植物 对水的需求。可见，降水量并非牧草产量形成的限制因子， 牧草生长期间的降水量基本满足牧草生长发育的水分需求。 （４）在光照因子与牧草产量的关联分析中，年日照时数， 牧草生长期４～９月的日照时数，４、５、８、９月的日照时数与牧 草产量的关联度较大，分别为３＇１８＝０．９３３ ９、 ＝０．９２８ ０、 ９ ＝０．９２２ ６、 ＝０．９１９ ７、＂／２３＝０．９１３ ０、 ＝０．９１３ １。司见，在 ３小结与讨论 （１）从上述计算结果可见，在共和县牧区，年日照时数和 温度和降水因子基本满足的情况下，牧草生长期日照时数的 多少，直接影响当年天然草地的牧草产量。 参考文献 ［１］邓聚龙．灰色理论与方法［Ｍ］．北京：石油理工大学出版社，１９９２． ［２］邓聚龙．灰色系统理论教程［Ｍ］．武汉：华中理工大学出版社，１９９０ ［３］刘思峰．灰色系统理论及应用［Ｍ］．北京：科学出版仕，１９９９：３０—７５ ４～９月的均温两大因子与天然草地牧草产量的关联度最大， 分别为 ８＝０．９３３ ９； ＝０．９３１ １。两因子与牧草产量的关联 度几乎相等，证明两因子对牧草生长的制约度同等重要，但 在该区域温度条件较好的情况下，日照因子就成了牧草生长
