专利名称:一种转座因子载体及获得其无选择标记转基因后代
的方法
专利类型:发明专利
发明人:瞿绍洪,李莘,潘龙玉,毕冬玲,李利华,田旭丹,王岚岚,
龙文莉,许赵蒙,刘中来,赵建华,邹小维,高晓庆,杨海河,曲海艳
申请号:CN2020114276.7申请日:20201214公开号:CN112481295A公开日:20210312
摘要:本发明涉及一种转座因子载体及获得其无选择标记转基因后代的方法,该载体通过以下步骤构建:1)将绿色荧光蛋白基因(GFP)、红色荧光蛋白基因(mCherry)潮霉素抗性选择标记基因(HPT)、来源于玉米的Ac转座酶基因(AcTPase)和Ds转座因子串联组装在一起,构建转座因子载体pBDL11,其中Ds因子不带有任何选择标记,并且预先在其内部设计一个AscI单酶切位点;2)构建一个在多克隆位点两侧均含有AscI酶切位点的中间载体pBDL11,以组装任意目的基因,然后将目的基因切下并克隆到Ds因子内部。本发明把基于GFP、mCherry双荧光标记的负选择技术与基于PCR的正选择技术相结合,在转基因后代依次淘汰含有T‑DNA的个体和选择含有目的基因的无选择标记个体,从而提高转基因后代的筛选效率。
申请人:浙江省农业科学院
地址:310021 浙江省杭州市石桥路198号
国籍:CN
代理机构:杭州九洲专利事务所有限公司
代理人:陈继亮
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