阿霉素诱导扩张型心肌病大鼠心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原变化

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阿霉素诱导扩张型心肌病大鼠心肌组织I、III型 胶原变化

李倩晓，于勤，那荣妹,刘百亭

【摘要】目的通过腹腔注射阿霉素的方法建立扩张型心肌病(DCM)心力衰竭大鼠模型，探讨其心肌组织I、m 型胶原的变化。方法选取体质量220〜280g的8周龄、SPF级近交系雄性SD大鼠95只，分为DCM组(n=70) 和对照组Cn=25)。DCM组采用腹腔注射阿霉素的方法构建DCM心力衰竭模型；对照组则注射等容积的0.9% 氯化钠注射液。给药后第8周，两组各取20只处死，行免疫组化检测心肌组织I、m型胶原表达。结果DCM 组大鼠心肌I、111型胶原平均光密度值均高于对照组(均尸< 0.05)，DCM组大鼠心肌I M型胶原比值大于对照 组CP < 0.05)。结论腹腔注射阿霉素诱导DCM心力衰竭大鼠心肌组织I、111型胶原特异性增生，比例失调。 【关键词】心肌病，扩张型;胶原，i、m型;阿霉素

doi:10.3969/j.issn.l671-0800.2016.11.019

【中图分类号】R2.2【文献标志码】A

【文章编号】1671-0800(2016)11-1445-02

扩张型心肌病（DCM)是一种以左 鼠I、m型胶原抗体(广州华拓生物科技 内出现棕褐色颗粒沉着为阳性反应);纯 ，即用型免疫组织化学EliVis-心室扩大伴收缩功能障碍为典型特征的 有限公司）

净水终止显色，苏木素复染1 min;自来

plus广谱试剂盒(试剂A:聚合物 水冲洗，1%盐酸酒精分化，自来水冲洗; 心肌疾病，是射血分数降低的心力衰竭 ionTM

90%、95%、100%、100% 试剂B:酶标羊抗鼠/兔IgG聚合 梯度酒精脱水（的常见病因之一，也是心脏移植的最常 增强剂，见病因[1_a。DCM发病率约4%。，5年生 物，福州迈新生物技术开发有限公司）。 存率约50%,大多数DCM患者最终发 1.2实验分组将SD大鼠分为DCM

各3 min);二甲苯透明，5 minx 2次;中 性树胶封片。每张切片选取10个不相

n=70)和对照组(n=25),置于同等条 互重叠的视野，展为充血性心力衰竭，并出现室性及室 组C测定标本阳性区的平均 DCM组予腹腔注射阿霉素， 光密度值，计算I、m型胶原比值。上性心律失常、血栓栓塞甚至猝死等[3' 件下饲养。

研究认为，DCM是遗传因素、自身免疫 每次2.5 mg/kg，1次/周，共6周,使阿霉 1.4统计方法采用SPSS 17.0统计软

kg。对照组腹腔 件进行分析。计量资料以均数±标准差 异常、病毒感染、毒物或药物等多因素共 素累积剂量达到15mg/

同作用所致[5_6]。DCM起病隐匿,呈进行 注射等容积的0.9%氯化钠注射液。

表示，两组比较f检验。P< 0.05为差

异有统计学意义。性恶化,预后差，临床误诊率高,故提高 1.3免疫组化检测至给药后第8周，存活41只；正 对该病的认识、早期诊断及早期治疗对 DCM组大鼠死亡29只，改善预后至关重要。本研究通过腹腔注 常对照组大鼠全部存活。两组任取20 射阿霉素的方法，诱导制备DCM心力 只，予以断颈处死,并取厚2〜3mm的

2

结果

对照组：心肌细胞间质中仅见少量

衰竭动物模型，探讨其心肌组织I、m型 左室中段心肌组织，行免疫组化检测心 棕褐色的I、111型胶原表达，且颜色较浅 胶原的变化。报道如下。1

材料与方法

心肌细胞 肌组织I、III型胶原表达。采用免疫组 (封二彩图1〜2); DCM组：织化学EliVisionTM plus两步法检测心 间质中可见大量棕褐色的I、m型胶原 且颜色较深（封二彩图3〜4)。 肌组织I、m型胶原表达。切片脱蜡至 表达，

m型胶原平均光密 1.1实验动物及试剂动物为体质量 蒸馏水;3%H2〇2室温孵育10 min;磷酸 DCM组大鼠心肌I、

为220〜280 g的8周龄、SIT级近交系 盐缓冲液(PBS) (pH 7.4)冲洗,3 minx 3

度值显著高于对照组(均P < 0.05),心

P < 雄性SD大鼠95只，购于大连医科大学 次；柠檬酸抗原修复液高压加热至沸腾 肌I /III型胶原比值亦大于对照组C

持续蒸汽5 min，自然冷却 0.05),见表 1。实验动物中心。试剂:阿霉素(浙江海正 后放入玻片，分别滴 药业股份有限公司)，0.9%氯化钠注射液 至室温;PBS冲洗,3 minx 2次；(青岛华仁药业股份有限公司），兔抗大

基金项目：杭州市医疗卫生及重点专 科专病科研项目（20140733Q26)

作者单位：310000杭州，杭州市红十字 会医院(李倩晓);大连大学附属中山医院(于 勤、那荣妹、刘百亭）

通信作者：李倩晓，Email: lqx786

@163.com

加1 : 200稀释的一抗(兔抗大鼠I、m 型胶原抗体)，置湿盒中4 °C过夜，阴性 对照滴加PBS代替一抗；PBS冲洗，3

3讨论

DCM的典型特征包括心肌细胞肥

大、变性及心肌纤维化[7]。心肌纤维化以

min x 3次;滴加聚合物增强剂(试剂A)， 心肌细胞增殖和心肌细胞外基质

室温孵育20 min; PBS冲洗,3 minx 3次； (ECM)过度沉积为主要表现[8_9]。ECM 滴加酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物（试剂 成分主要包括胶原、弹性蛋白及蛋白聚

B),室温孵育 30 min; PBS 冲洗,3 minx 3

糖等，在维持心脏正常结构和功能中起 重要作用，与心肌肥厚、心肌纤维化有直

次;DAB显色，观察标本染色程度(细胞

• 1446 •

接关系[1°]。DCM导致心力衰竭的发生

发展过程，以ECM异常增多和过度沉积 组别

正常对照组

为主要病理基础，其中最明显的表现

DCM组

是I、111型胶原的变化，即胶原含量升

r值

高，比例增大。I型胶原主要为粗纤维， P值在成人心肌中占胶原总量的85%,是构 成心肌胶原的主体成分，其僵硬度大，而

伸展与回弹性小，主要维持心肌张力，对 参考文献：抗牵拉;III型胶原主要为细纤维，约占 11%,其伸展与回弹性较大，主要使心肌

表i

Modem Practical Medicine, November 2016, Vol. 28, No. 11

两组大鼠心肌i、ni型胶原平均光密度值比较

m型胶原例数I/in型胶原比值I型胶原

2020

24.72±3.2561.98 士4 .3630.62< 0.05

21. 士3 .4744.06±4.2318.33<0.05

1.12±0.021.41±〇.〇335.68<0.05

原特异性增生，比例失调。

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生与传导，导致收缩功能障碍。本研究 [4] LakdawalaNK,Winterfield JR, Funke BH. 免疫组化检测显示，对照组大鼠心肌细 胞间质中仅见少量棕褐色的I、m型胶 原表达，而DCM组大鼠心肌细胞间质 中可见大量棕褐色的I、m型胶原表达。

DCM组大鼠心肌I、m型胶原平均光密

度值均显著高于对照组（均P < 0.05), 心肌I /m型胶原比值亦大于对照组cp < 0.05)。提示腹腔注射阿霉素诱导

收稿日期:2016-05-05 (本文编辑:孙海儿）

DCM心力衰竭大鼠心肌组织I、m型胶

无创正压通气治疗慢性阻塞性肺疾病合并

II型呼吸衰竭失败的相关因素研究

何後彳肖

【摘要】目的探讨无创正压通气(NPPV)治疗慢性阻塞性肺疾病合并II型呼吸衰竭失败的相关因素。方法根 据常规治疗和NPPV治疗后的结局将80例慢性阻塞性肺疾病合并II型呼吸衰竭患者分为治疗成功组和治疗失 败组，各40例。探究NPPV失败的危险因素。结果失败组心率(HR)、呼吸频率(RR)均高于成功组(均P < 0.05)。血气分析显示,NPPV 2 h后两组动脉血pH值和动脉血二氧化碳分压(PaC02)值差异均有统计学意义 (均户<0.05)。回归分析显示，年龄、急性生理与慢性健康状况(APACHEII)评分、血pH值、PaC02值为影响NPPV 治疗的危险因素。结论患者年龄、HR、RR、收缩压、APACHEII评分、动脉血pH值及PaC02均影响治疗结 果;年龄、APACHEII评分、血pH值、PaC02值均为影响NPPV治疗的危险因素。【关键词】肺疾病，阻塞性,慢性;呼吸衰竭;无创正压通气;危险因素

doi:10.3969/j_issn.l671-0800_2016_ll_020

【中图分类号】R563;【文献标志码】

作者单位：

A 【文章编号】1671-0800(2016)11-1446-03

321000浙江省金华，金华市人民医院

通信作者：何俊俏，Email: 13327521@qq.com

李倩晓，于勤，那荣妹，等.阿霉素诱导扩张型心肌病大鼠心肌组织I、III型胶原变化(见正文第1445页)

图1正常对照组心肌I醒胶原图2

(xi〇〇)

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正常对照组心肌III型胶 图3 DCM组心肌I型胶原图4 DCM组心肌III型胶原

(xl〇〇)

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孙丽萍，谢菲，应景艳，等.银杏达莫注射液治疗糖尿病视网膜病变疗效和安全性的Meta分析(见正文第1500:真）

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银杏达莫注射液对糖尿病视网膜水肿、出血情况的影响分析

24

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图8银杏达莫注射液对糖尿病视网膜眼底新生血管和灌注区的影响分析

47

61

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49

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图9银杏达奠注射液对糖尿病视网膜病变视力的影响分析

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图5文献偏倚风险评估

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图10银杏达莫注射液对糖尿病视网膜病变安全性分析

韩雷，胡云根，方伟利，等.自制三维解剖型微动肩锁钢板的生物力学研究(见正文第1513寅)