(一)发酵及提取工艺流程
菌种(石河子大学菌种)
培养基:蛋白胨1%,牛肉膏,酵母膏1%,NaCl 0.5%, 葡萄糖1%,琼脂粉 2%
工艺条件: pH: 7.0 温度: 34℃ 培养时间: 20-24h 斜面
培养基: 1)尿素0.5% (100℃, 5min 分消); 2)葡萄糖3%、玉米浆2.5%、K2HPO4.3H2O 0.1%,MgSO4.7H2O 0.04% 种子摇瓶(115℃,15min) 3) 分消后1),2)混合 工艺条件:pH:7.0 温度:34℃ 转速:200rpm 培养时间: 12hr
培养基:(15L发酵罐,10L装液量)5%接种量(500ml摇瓶种子)
(一) 葡萄糖10%、玉米浆0.3—0.55%,Na2HPO4.12H2O 0.17%、KCl
发酵罐0.03%, MgSO4.7H2O 0.06%,初尿:1.8-2.0%(40%尿素流加)
(SY-3015)(二) 1)葡萄糖 1000g,MgSO4.7H2O 16.16g,KCl 12g,MnSO4 20mg,
Fe SO4 20mg,定容至9000ml,在发酵罐中灭菌;
2)糖蜜 10g,玉米浆 60ml,Na2HPO4.12H2O 25.2g,VB1 2mg 定
容至500ml,单独灭菌后转入发酵罐;
初始条件:pH: 7.0 温度:34℃ 转速:400rpm
罐压:0.05-0.1Mpa 通气量:400-600L/h
发过程控制:1)初始pH维持在7.0 左右,流加40%初尿1%一次,长菌期(0-12hr) 酵液
控制pH不大于8.2,菌体生长达到稳定期后开始产酸,pH降至7.0
左右,应当流加尿素,维持pH 7.1-7.2左右;
2)生长初期转速400rpm,中后期溶氧降低,逐渐提高转速,溶氧不
低于5%;
3)初始温度34℃,开始产酸后,逐步提高温度36℃,产酸后期,提
高到38℃;
4)葡萄糖若消耗过快,适当补加葡萄糖,约(30-36hr)停止发酵;
GQ-75分离机 5)添加适当消泡剂 离 心过程测量:1)初始测糖,pH,DO值 (15000rpm) 2)12hr开始,每6小时测定发酵液中谷氨酸含量,残糖量,pH、溶
氧,OD(菌体浓度)值,镜检菌体形态。
结晶(中和)罐,酸罐, 碱罐 (等电结晶) 等电点母液 离子交换 (去菌体)发酵液 分离
湿谷氨酸 高流分
(二)谷氨酸的等电点-离子交换提取谷氨酸工艺
发酵液 缓慢加盐酸至pH 4-4.5 产酸低时投入晶种(0.2%量) 搅拌育晶2小时 缓慢加盐酸至pH 3-3.2 搅拌16hr 等电母液上柱体积 =湿树脂体积(ml)*0.06/发酵液中Glu浓度(g/ml) 静止沉降4hr (一般含Glu1.5-2%)母 液 湿谷氨酸 732树脂(70%装柱量) 上柱交换 树脂预处理 (60℃热水,控制流速50ml/min左右) 热水预热 (控制流速1滴/s) 60℃4%NaOH洗脱 收集 水洗树脂及疏松 用5-6%HCl再生 水洗树脂及疏松 低高尾流流流 分分分 pH 1.5-2.0 pH 2.5-9.0 pH 9-11 盐酸调pH1.5 (三)谷氨酸钠的精制操作 1、中和
工艺条件:湿谷氨酸:水:(固体)纯碱=1:2:(0.3-0.34) T=60℃, pH=6.4(用试纸测)
注意:60℃下,搅拌下,徐徐加入固体纯碱中和,至pH 6.4 ,搅拌至澄清。
2、谷氨酸钠喷雾干燥
工艺流程:中和完的澄清液,用SY-6000小型喷雾干燥仪干燥并收集; 工艺条件:
进风170℃,出风温度65-75℃,进料量控制40%(即500ml/h),空气流量 600l/h
(四)谷氨酸产生菌发酵代谢曲线示例
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