实验四 小鼠胚胎培养
实验目的:训练学生实验动物小鼠超数排卵、胚胎收集、胚胎培养技
术。观察早期胚胎发育过程。
实验器材:CO2培养箱,CZB培养液,石蜡油,35 m 培养皿,小东
物手术器械。小鼠笼及其附件。、
实验动物:25 克雌性小鼠30只。成年雄鼠10只。
实验药品:PMSG、HCG、生理盐水, CZB培养液,TCM199培养
液
实验步骤:一、液滴的制作:用加样枪把100微升的CZB或TCM199,
做成两个液滴,上面覆盖石蜡油。用前在CO2培养箱平衡一昼夜。
二、0天雌鼠注射PMSG 12IU, 48小时后腹腔注射HCG。当晚
三、按1:3的公母比例放入公鼠笼中,第二天晨、第三天晨检察有阴道拴的母鼠检出。
四、小鼠颈椎断处死。剖开腹腔将输卵管两端剪开,取出输卵管,放入盛有37℃
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生理盐水的表皿内在40倍体视镜下捡出胚胎。
五、将检出的胚胎,放入培养液滴中,每个液滴放入5枚胚胎。将培养皿放入37℃,95%湿度的CO2培养箱中。
六、每隔两天观察培发育情况并记录下来发育数目。并画出桑椹胚、囊胚、和脱出囊胚图。
注意事项:雌、雄小鼠合笼后,不一定交配。有阴道拴的母鼠不
一定有胚胎。取出胚胎不一定都是受精卵。受精卵不一
定都能正常发育下来。
移送胚胎时注意小心,免得丢失。
每个小组设一名联系人。及时与老师保持联系。
实施步骤:因实验条件限制,每组10人,共分10组
实验步骤安排:
1、 注射PMSG 、hCG
2、 雌雄交配
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3、 观察阴道拴
4、 制作培养液滴
5、 制作吸胚针
6、 观察胚胎
实验 分组:
第一组:学号81060901至81060914;组长李万宏
第二组:学号81060915至81060924;组长李继富
第三组:学号81060925至81060935;组长范圣涛
第四组:学号81060936至81061006;组长刘 颖
第五组:学号81061007至81061019;组长高 鹤
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