标准操作规程 编号：STD-SOP E岬018- 00
题 制 审 批
目
高效液相色谱仪使用维护与保养规程 颁发部门分析测试中心 日 期
定
核
日 期 日 期
准 发
分析测试中心
分
目的：建立（安捷伦）Agilent1120型高效液相色谱仪使用、维护与保养规程 范围：（安捷伦）
Agilent1120型高效液相色谱仪 职责：分析测试中心对本规程的实施负责 正文：
1. 系统组成：本系统由溶剂输送泵、手动进样器、 VWD外可见检测器、内置 EZChrorft谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不问断电源等辅助设备。
2. 准备 2.1 15min。 2.2 2.3
滤。
根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。
配制样品和标准溶液（也可在平■衡系统时临用配制），用合适的0.45 mt虑 膜过准备所需的流动相，用合适的0.45（或0.22 ）
m＜膜过滤，超声脱气10〜
2.4 3.
检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
开机：打开打印机、电脑显示器、主机等操作系统；接通 HPLC!源，按下
电源开关。等待HPLC112聚及检测器自检完毕。
3.1
启动EZChro元作站：在桌面双击EZChrom图标，进入EZChrom的主界
面。在主界面双击配置好的仪器，比如下面的HPLC”安捷伦1120”，进入EZChrom的 控制界面。如果需要打开Offline 的工作站（即只处理数据不控制仪器），可以右键 点击仪器的图标，选择 离线打开。
3.2打开泵：点击菜单栏项下的“控制”选择“仪器状态” ，即出现单元泵和 VW酸测器独立操作界面。点击单元泵操作界面的泵的图标， 开启泵。将输入法切换 至英文
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输入状态。点击该界面左侧溶剂瓶（A）,根据实验一般要求，输入“实际体 积、总体积、溶剂操作”等相关应用数据，确认即可。点击“ 流量ml/min”右侧的 数据，在英文输入法下输入相关的流量，确定即可完成流量设定。
3.3打开检测器的笊灯：点击菜单栏项下的“控制”选择“仪器状态”，即出现 单元泵
和vwg测器独立操作界面。点击 VWD佥测器操作界面的笊灯的图标，开启 笊灯；笊灯预热片刻，即可。（注：灯的颜色为紫色时，表示开启笊灯；灯的颜色为 灰色时，表示关笊灯）。
点击“波长nm‘右侧的数据，在英文输入法下输入相关的波长，确定即可完成 波长设定（范围：190〜650nm ；进样前，在VW酸测器操作界面下，点击右侧的“带 有一横红线的坐标图”，即对检测器调零。
4. 更换流动相并排气泡（应在建立方法前完成）
4.1将溶剂瓶中管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中； 4.2逆时针转动泵的排液阀60〜90° ,打开排液阀；
4.3点击菜单栏项下的“控制”选择“仪器状态”，即出现单元泵界面，点击“流 量ml/min ”右侧的数据，在英文输入法下输入相关的 5〜10的数字，确定即可进行 排气。泵大
约以高速流速冲洗，一般 3〜5min （可视情况而定）即可手动停止。
4.4将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
4.5如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
4.6 如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设 流量为5ml/min ,
开启泵，冲洗3min后再停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。
5. 方法建立
5.1新建方法：在EZChrom软件内，从文件菜单依次选择方法＞方法向导，选 择创建
新的方法，点击即可（或从文件菜单依次选择方法〉新建方法）。出现“单元 泵-VWD佥测器-辅助图谱-基线检查-触发器”的界面，依次对5个单元进行设定。
5.2 （方法中）单元泵设定：在英文输入法状态下，根据试验的要求，对“流 量、最
”指标，
小压力、最大压力、停止时间（也称为采样时间，不可点击无限制）
输入相关数值，即可。（右侧的时间表，是表示根据单位时间内变更不同流量的数据 的编辑表，一般不用进行编辑）
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5.3 （方法中）VW射测器设定：在英文输入法状态下，在 VW!＞测器模块下， 根
据试验的要求，对“波长（范围：190〜650nm）、停止时间（也称为采样时间，一 股选择与泵一致即可）”指标，输入相关数值，即可。
5.4其他模块：辅助图谱、基线检查 这两个模块中，按默认状态即可。 触发器, 选择“外
部”控制即可。
5.5方法保存及下载。从文件菜单依次选择方法＞另存为，（根据习惯或试验需 要）输
入方法文件名，点击保存即可。然后 从控制菜单选择下载方法，即完成方法 设定和建立，并可以着手进行试验。
5.6方法下载，实验员也可以根据以往实验需要，打开以前设置的方法，然后 从控制菜
单选择下载方法，即可准备进行试验。
6. 平■衡系统
6.1在建立方法并下载方法后，从控制菜单选择预览运行，检查基线，如基线 平稳，（通
过手动停止等）即可进行试验；如基线不符合要求，应待基线平稳才进 行试验。
6.2在用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需 6.2.1 6.2.2
检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。
6倍柱体积的流动相。
观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过10%如超过则可初步判 断为柱前
管路仍有气泡，按4.5、4.6操作。
6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移 ＜0.01mV/min,噪声为＜0.001mV时,
可认为系统已达到平■衡状态，可以进样。
7. 进样
菜单选择“仪器状态”，在VWg测器操作界面下，
7.1 进样前，从的“控制”
点击右侧的“带有一横红线的坐标图”，即对检测器调零，校正基线零点。
7.2进样前，用试样溶液活洗注射器，并排除气泡后抽取适量。
7.3每次进样前，从控制菜单选择单次运行。输入“样品ID”选项，一般为文 件名称，
“数据文件”与“样品ID”的内容一致。点击“开始”，待系统达到就绪状 态，即可进样分析。
7.3.1如提前停止图谱采集，可以 从控制菜单选择停止运行。
7.3.2注意事项：溶剂瓶（A）（见“3.2 ”项下）中“实际体积、总体积、溶剂 操作”等
相关应用数据不符合逻辑等，系统将不能达到就绪状态，不能进行进样分
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析。比如，实际体积（或因忘记修改数值）偏低，小于或接近“溶剂操作”要求的 数值。此时不能进样分析，如进样，系统持续平衡，不会出现图谱等情况。
7.4界面切换。在采样过程中，可以通过左下方的“方法、序列、报告、控制 （仪器状
态）、视图（显示所有数据）”快捷键切换。
或是通过菜单栏的“控制（仪器状态）、视图（显示所有数据）”进行切换。
7.5图谱编辑，要使用离线打开工作站。 8. 维护与保养
8.1用于此仪器的所有自配流动相及水均须经过 ①0.22回或①0.45\"!的水或有滤。
8.2仪器管道系统平时应保存于70%甲醇中。
8.3与该项目无关人员未经过允许，不得更改除上述自行设定外的其它参数。 8.4出现异常情况不得擅自检修，应及时上报告以寻求正确的处理办法。 8.5仪器要可靠接地。
9. 附：仪器使用登记表。见附贞。
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机系膜过
附贞:
仪器使用登记表
仪器名称： HPLC 仪器型号：
公司编号:
使用时间段 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 时分至时分 使用日期 年 月曰 使用项目 使用前 正常口；故障口 正常口；故障口 使用后 使用人 注备 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 正常口；故障口 正常口；故障口 年 月曰 正常口；故障口 第5页共5页
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