盖晓东等ＣＤ４ ＣＤ２５ ＦＯＸＰ３’调节性Ｔ细胞及其亚型在结直肠癌组织中分布和临床意义的研究第１期 ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦＯＸＰ３＋调节性Ｔ细胞及其亚型在结直肠癌组织中分布和 临床意义的研究① 盖晓东赵丽微历春（北华大学基础医学院病理解剖教研室，吉林１３２０１３） 中国图书分类号 １１７３０．３ 文献标识码 Ａ 文章编号 １０００－４８４Ｘ（２０１０）０１．００７５．０４ ［摘要］目的：探讨ＣＤ４ ＣＤ２５ ＦＯＸＰ３ 调节性Ｔ细胞（Ｔｒｅｇ）及其亚型在结直肠癌组织（ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＣＲＣ）的分 布和临床病理特征的关系。方法：收集４２例ＣＲＣ新鲜手术标本，应用冰冻切片、免疫组织化学ｓＰ法检测肿瘤组织和癌旁组织 中ＦＯＸＰ３ 阳性细胞数，分析其与临床病理特征的相关性；应用双重免疫组化检测ＦＯＸＰ３和ＩＣＯＳ表达，分析ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ和ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ—Ｔｒｅｇ两种细胞亚型分布情况。结果：ＣＲＣ患者肿瘤组织中ＦＯＸＶ３分布显著多于癌旁组织，差异显著 （Ｐ＜０．００１）；中低分化组Ｔｒｅｇ细胞数明显高于高分化组（Ｐ＜０．０１）；淋巴结转移组Ｔｒｅｇ细胞数明显高于无淋巴结转移组（Ｐ＜ ０．０５）；无远处转移组Ｔｒｅｇ细胞数明显高于有远处转移组（Ｐ＜０．０５）；ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ细胞亚群在ＣＲＣ组织中高表达，与癌 旁组织相比差异显著（Ｐ＜０．０１）。结论：ＣＲＣ的发生发展与其癌组织局部微环境中Ｔｒｅｇ数量变化相关，Ｔｒｅｇ在ＣＲＣ组织过量 表达可能是导致肿瘤免疫逃逸的重要因素之一；抑制ＣＲＣ微环境中浸润性Ｔｒｅｇ细胞功能可提高肿瘤局部免疫治疗效果。 ［关键词］结直肠癌；Ｔｒｅｇ；ＦＯＸＰ３；ＩＣＯＳ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４ ＣＤ２５ ＦＯＸＰ３ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｓｕｂｓｅｔｓ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｆｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ＧＡＩＸｉａｏ—Ｄｏｎｇ，ＺＨＡＯ Ｌｉ—Ｗｅｉ， Ｃｈｕｎ．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆＢａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｈｕａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｌｉｎ １３２０１３，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４ ＣＤ２５ ＦＯＸＰ３ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｉｌｓ（Ｔｒｅｇ）ａｎｄ Ｔｒｅｇ ｓｕｂｓｅｔｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｏｌ— ｎａｄ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅｉｒ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｃｌｉｎｉｃｏ—ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｆ ａｔｕＩｅ＿ｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｆｒｏｚｅｎ ｓｅｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（ｍｅ）ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇ ｉｎ ｆｒｅｓｈ ｓｐｅｃｉｍｅｎ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ４２ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｗｔｈ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇ ｗａｓ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｉｎ ｔｅｒｍｓ ｏｆ ｉｔｓ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｅｌｉｎｉｃｏ—ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ａｎｄ ｐｅｒｉ—ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅ．Ｄｏｕｂｌｅ ｓｔａｉｎ— ｉｎｇ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｍｒｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＩＣＯＳ ｍａｄ ＦＯＸＰ３．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ｍｅａｎ ２４．１）ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｐｅｒｉ—ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅ（ｍｅａｎ ０．７）．Ａ ｈｉｇｈｅｒ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ＦＯＸｔＹ３ Ｔｒｅｇｓ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｗｉｔｈ ｐｏｏｒ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．１ｙｍｐｈａｔｉｃ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ａｎｄ ｎｏｎ－ｄｉｓｔｎａｔ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｗｉｔｈ ｗｅｌｌ ｄｉｆｅｍｎ— ｔｉａｔｉｏｎ，ｎｏｎ—ｌｙｍｐｈａｔｉｃ ｍｅｔｓａｔａｓｉｓ ｎａｄ ｄｉｓｔａｎｔ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆＦＯＸＶ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（８１％）ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｅｐｒｉ—ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅ（１０％）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇ ｍａｙ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｅｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ． Ｏｕｒ ｄａｔａ ｓｕｐｐｏｒｔ ｔｈｅ ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ ｔｈａｔ ｔｕｍｏｒ ｉｉｆｎｈｒａｔｉｎｇ ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇｓ ａｔｔｅｎｕａｔｅ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｇａｉｎｓｔ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔ ｔｈａｔ ｓｔｒａｔｅｇｙ ｔｏ ｏｖｅｒｃｏｍｅ ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｍａｙ ｂｅ ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｅｏｌｏｒｅｅｔａｌ ｃａｎｃｅｒ． １Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓＪ Ｃｏｌｏｒｅｃｔｌａ ｃ￣ｃｉｎｏｍａ；Ｔｒｅｇ；ＦＯＸＰ３；ＩＣＯＳ 结直肠癌（Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ，ＣＲＣ）目前仍然是导 探索新的治疗方法。 致人类死亡的恶性肿瘤之一。目前主要的治疗手段 研究表明，机体可通过多种免疫机制来杀伤 是采用包括手术在内的综合治疗，但是化疗药物在 ＣＲＣ肿瘤细胞，而肿瘤细胞本身也可利用不同的方 杀伤癌细胞的同时，也杀伤正常细胞，了治疗的 式来逃逸这些防御机制。许多肿瘤抗原为自身抗 疗效。免疫系统对肿瘤存在特异性和非特异性应 原，肿瘤内浸润的ＦＯＸＰ３ 调节性Ｔ细胞（Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ 答，其机制十分复杂，涉及多种免疫细胞及其分泌的 Ｔ ｃｅｌｌｓ，Ｔｒｅｇ）细胞能抑制Ｔ细胞对外来和自体抗原 产物。因此，研究ＣＲＣ组织微环境下免疫细胞的分 的免疫应答，因而在维持对自身成分耐受的同时也 布情况，将有助于了解这种疾病的发病和转移机制， 会阻止机体对肿瘤细胞的免疫应答，从而导致了肿 瘤细胞的免疫逃避。 ①本文受吉林省教育厅项目（古教科合字［２００８］第１２８号）资助 Ｔｒｅｇ代表一群独特的ＣＤ４ 辅助性Ｔ细胞亚群， 作者简介：盖晓东（１９６２年一），女，博士，教授，硕士生导师，主要从 在控制自身免疫中发挥着重要作用。ＣＤ４ ＣＤ２５ 事肿瘤免疫学研究及肿瘤分子病理学研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｇａｉｘｉ— ａｏｄｏｎｇ＠ｖａｈ ）．ＣＯｌｌｌ，ｃｎ。 是其主要的分子表型。ＦＯＸＰ３属于叉头转录因子家 族成员之一，是控制Ｔｒｅｇ发育及其功能效应的关键 因素，也是Ｔｒｅｇ较特异且可靠的标记ｌ１。Ｊ。最新研 究发现，根据人胸腺、扁桃体、淋巴结和外周血中 ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇ细胞表面是否表达ＩＣＯＳ分子，可以将 其分成ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ和ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ—Ｔｒｅｇ 两种细胞亚型ｌ４ｊ。 本研究通过酶标免疫组化法检测ＣＲＣ肿瘤组 织和癌旁组织中Ｔｒｅｇ的分布，双重免疫组化法检测 Ｔｒｅｇ亚型的表达，探讨Ｔｒｅｇ在ＣＲＣ组织的分布与临 床病理特征的相关性及其亚型的表达情况，为临床 ＣＲＣ的免疫治疗提供理论基础和实验依据。 １材料与方法 １．１试剂、材料和主要仪器 １．１．１试剂小鼠抗人ＦＯＸＰ３单克隆抗体、小鼠 抗人ＩＣＯＳ单克隆抗体均为ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ公司产品；即 用型免疫组化超敏ｓＰ试剂盒、免疫组化双染试剂 盒、ＤＡＢ显色试剂盒、多聚赖氨酸均为福州迈新生 物技术公司产品；ＯＣＴ包埋剂为ＳＨＡＮＤＯＮ公司产 品；其它均为国产分析纯。 １．１．２材料本实验共收集北华大学附属医院普 通外科２００７年１０月至２００９年４月间结直肠癌手术 切除的新鲜标本４２例，其中结肠癌１９例，直肠癌２３ 例；年龄在３６～７９岁之间，平均年龄５９．９±１３岁； 男２８例，女ｌ４例。所有标本均经病理学诊断证实， 并有详细的临床资料。所有病伢均未行放、化疗及 生物免疫治疗。 每例标本均采集了结直肠癌患者的肿瘤组织 （避开坏死、炎症区域）、癌旁组织（取自相应肿块旁 ３～５ ｃｍ肠组织）。标本离体后ＯＣＴ包埋，迅速置于 一１９６￣Ｃ液氮中速冻，后转移至一８５￣Ｃ超低温冰箱保 存备用。 １．１．３主要仪器恒温冷冻切片机（ＣＭ１９００）为德 国Ｌｅｉｃａ公司产品；超低温冰箱为１３本ＳＡＮＹＯ产品； 显微镜（Ｏｌｙｍｐｕｓ ｃｘ２１）为日本Ｏｌｙｍｐｕｓ产品；数码显 微镜（Ｍｏｔｉｃ ＤＭ．ＢＡ４００）、图像采集系统（Ｍｏｔｉｃ Ｉｍａｇｅｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ ３．２）均为中国重庆Ｍｏｔｉｃ公司产品。 １．２方法 １．２．１免疫组化所有标本制成５ ｍ厚冰冻切 片，按免疫组化ｓＰ试剂盒说明进行单染色法检测 ＦＯＸＰ３蛋白表达，双染色法检测ＦＯＸＰ３蛋白和ＩＣＯＳ 蛋白的表达，用ＰＢＳ代替一抗作为阴性对照。Ｔｒｅｇ 细胞阳性标准：细胞形态完整，结构清晰，棕黄色颗 粒特异性定位于细胞核。ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ阳性 标准：黑色和红色颗粒同时特异定位于细胞核（黑 中国免疫学杂志２０１０年第２６卷 色）与细胞膜（红色）。采用双盲法进行观察，随机对 每张切片选择１０个高倍视野（４００×）计数阳性细胞 数，求其平均值。 １．３ 统计学方法 数据以 ±Ｓ表示，结果用 ＳＰＳＳ １２．０统计学软件进行ｔ检验和７ 检验，以 Ｐ＜０．０５为差异显著，有统计学意义；Ｐ＜０．Ｏ１为差 异非常显著，有统计学意义。 ２结果 ２．１肿瘤组织病理学特征４２例ＣＲＣ肿瘤组织分 化程度根据恶性肿瘤的组织学分级标准（Ｂｒｅｄｅｒｓ分 级），全部病例分为高、中一低分化两组；临床分期根 据１９８６年中国全国大肠癌会议提出的Ｄｕｋｅｓ分期 方法修正方案及２００２年国际抗癌联盟（ＵＩＣＣ）提出 的大肠癌ＴＮＭ分期标准［５ ；原发肿瘤浸润深度参照 ２００２年国际抗癌联盟（ＵＩＣＣ）标准（表１）。 ２．２ ＣＲＣ组织中Ｔｒｅｇ的分布ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇ细胞形 态完整，结构清晰，ＤＡＢ显色核呈棕黄色，散在分布 于肿瘤组织中，尤其在癌组织与正常组织交界处分 布密集。本实验４２例ＣＲＣ组织中均有ＦＯＸＰ３ 表 达，其表达水平２４．１±６．３显著高于癌旁组织０．７± ２．０，经统计学分析差异显著（Ｐ＜０．００１）（表２， 图１）。 ２．３ ＣＲＣ组织Ｔｒｅｇ分布与临床病理特征的关系 对ＣＲＣ组织中Ｔｒｅｇ分布与临床病理特征进行分析， 结果表明：在中低分化组Ｔｒｅｇ细胞数（２５．８ ４－６．５）明 显高于高分化组（１８．２±４．３），Ｐ＜０．０１；淋巴结转移 表１ ４２例ＣＲＣ患者临床病理特征 Ｔａｂ．１ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｈｏｓｅ ｔｌｌｍｏｌ￣Ｗｅｌｔ￣ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ６ｓｓｕｅ ａｓｓａｙ Ｎｏｔｅ：４ ｃａｓｅ ｏｆ Ｍｕｃｏｉｄ ｅａｒｃＡｎｏｍａ ｗｅｒｅ ｎｏｔ ｉｎｃｌｕｄｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｇｒａｄｅ． 盖晓东等ＣＤ４ ＣＤ２５ ＦＯＸＰ３ 调节性Ｔ细胞及其亚型在结直肠癌组织中分布和ｌ临床意义的研究第１ 表２ ＣＲＣ组织和癌旁组织ＦＯＸＰ３表达水平比较 Ｔａｂ．２ Ｍｅｄｉａｎ ｄｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｍａｋｅｒｓ ＦＯＸＰ３ ｉｎ ｃｏｌ－ ｏｒｅｃｔａｌ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｎｄ ｐｅｒｉ－ｃａｎｃｅｒ ＩＪｓｇｕｅ ！ ！ ！ ｉ！ ２ Ｐｅｒｉ．ｃａｌｌｃｅｒｔｉｓｓｕｅ ４２ ０．７±２．０ ＜０．０ｏ１ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｔｕｉｔｌｏｒ ４２ ２４．１ ４－６．３ 图１免疫组化检测ＦＯＸＰ３ Ｔｒｅｇｓ和ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ 在组织中表达 Ｈｇ．１ ＦＯＸＰ３ ｇ ａｎｄ ＦＯＸＰ３＋ＩＣＯＳ ｍｇ ｉｎ ＣＲＣ ｔａｌｌｉｅｓ ＦＯＸＰ３ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｉｎ Ａ．Ｐｅｒｉ－ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅ×４００ Ｂ．Ｌｏｗ ｍａｇｎｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｉｎ ＣＲＣ×１００：Ｃ．Ｈｉｇｈ ｍａｇｎｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｉｎ ＣＲＣ× ４００；Ｄ．Ｄｏｕｂｌｅ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｏｆ ＦＯＸＰ３×４ＯＯ（ｂｌａｃｋ ｃｏｌｏｒ，ｎｕｃｌｅａｒ）ａｎｄ ＩＣＯＳ（ｒｅｄ ｃｏｌｏｒ，ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ）． 表３ ＣＲＣ组织ＦＯＸＰ３表达与临床病理参数的关系 Ｔａｂ．３ ｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｌｌ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐａｔｈｏ－ ｌＯｇｉｃａｌ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ 组Ｔｒｅｇ细胞数（２４．４±６．４）明显高于无淋巴结转移 组（１８．９±７．５），Ｐ＜０．０５；无远处转移组Ｔｒｅｇ细胞 数（２１．５±７．３）明显高于有远处转移组（１１．２± １．９），Ｐ＜０．０５。但与肿瘤浸润深度和临床分期相 关性无统计学意义（表３）。 ２．４ ＣＲＣ组织中Ｔｒｅｇ亚型的表达本实验采用双 重免疫组化法检测ＣＲＣ组织中表达Ｔｒｅｇ亚型表达 情况。ＦＯＸＩ￣ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ细胞表现为黑色颗粒定位 于细胞核（ＦＯＸＰ３ ），红色颗粒定位于细胞膜 （ＩＣＯＳ ）。结果：４２例ＣＲＣ组织中有３４例可见到 ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ阳性细胞的表达，阳性率为 ８１％；１０例表达ＦＯＸＰ３ 癌旁组织中，仅有１例可见 到ＩＣＯＳ分子的弱表达，阳性率为１０％，经统计学分 析差异显著（Ｐ＜０．０１），（图１）。 ３讨论 肿瘤通过各种直接或间接的机制来逃避机体免 疫系统的监控。一系列的研究已经证明，Ｔｒｅｇ细胞 与肿瘤免疫逃避机制密切相关。在肺癌、乳腺癌、卵 巢癌以及出现淋巴结转移的黑色素瘤患者的外周血 淋巴细胞和肿瘤浸润淋巴细胞中，存在Ｔｒｅｇ比例增 高现象ｌ６ Ｊ。Ｔｒｅｇ通过细胞与细胞直接接触或通过 细胞因子的释放，对效应性ＣＤ４ ／ＣＤ８ Ｔ细胞活化 和增殖发挥抑制作用。其效应机制主要是抑制 ＣＩＭ Ｔ细胞增生、抑制肿瘤特异性抗原激活的 ＣＤ４ 效应细胞分泌ＩＬ－２［１０，１１ Ｊ，抑制ＣＤ８ ＩＦＮ． 和 ＴＮＦ．ａ产生，并在肿瘤微环境中能ＣＴＬｓ（Ｃｙｔｏ— ｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ）细胞毒性颗粒释放，使肿瘤细胞 逃逸免疫杀伤ｌ１２，１３］。 因此，在以细胞免疫为主的肿瘤免疫过程中， Ｔｒｅｇ处于关键环节，在机体免疫调节中起重要作用， 决定了免疫反应的最终走向是激活免疫还是诱导耐 受。本实验研究ＣＲＣ患者肿瘤组织内浸润的Ｔｒｅｇ 细胞分布情况，发现ＣＲＣ患者组织内Ｔｒｅｇ数量显著 高于癌旁对照组。对Ｔｒｅｇ细胞与临床病理参数关 系进行分析后发现：中一低分化患者癌组织中Ｔｒｅｇ数 量显著高于高分化者，肿瘤分化程度越低Ｔｒｅｇ数量 越多，恶性程度越高。这些结果提示Ｔｒｅｇ在ＣＲＣ肿 瘤免疫中扮演重要角色，Ｔｒｅｇ可能影响了肿瘤的分 化，促进了肿瘤进展。Ｗｏｏ等ｌ ｊ首先报道了Ｔｒｅｇ表 达与肿瘤侵犯局部淋巴细胞有关。本实验也发现， 淋巴结转移阳性患者癌组织中Ｔｒｅｇ数量显著高于 无淋巴结转移者。提示随着肿瘤细胞浸润到局部淋 巴结，Ｔｒｅｇ介导的免疫抑制有增强趋势。另外，本实 验还显示一个值得注意的现象，Ｔｒｅｇ在局限性肿瘤 的浸润者ＴＩＬ表达显著高于有远处转移者。提示 Ｔｒｅｇ在恶性肿瘤中的浸润可能是一个动态过程，作 为局限性肿瘤的最初反应，Ｔｒｅｇ数量增加，而肿瘤转 移扩散后Ｔｒｅｇ的数量相对减少。 根据ＩＣＯＳ分子的表达，将其分成ＦＯＸＰ３ Ｉ． ＣＯＳ Ｔｒｅｇ和ＦＯＸＩ￣ ＩＣＯＳ—Ｔｒｅｇ两组细胞。 ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ细胞通过ＩＬ－１０、￣Ｆ－１３抑制ＣＩＭ Ｔ 细胞增殖，而ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ—Ｔｒｅｇ细胞仅通过ＴＧＦ—Ｊ３ 来发挥功能＿４ｊ。在人前列腺癌、黑色素瘤研究中发 现，ＴＩＬ（Ｔｕｍｏｒ－ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ，ＴＩＬ）中多为 ＦＯＸＰ３＋ＩＣＯＳｈｉｇ Ｔｒｅｇ细胞群，而患者外周血及正常 ・７８・ 中国免疫学杂志２０１０年第２６卷 人群外周血以ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳｋ Ｔｒｅｇ细胞群为主。 ４ Ｉｔｏ Ｔ，Ｈａｎａｂｕｅｈｉ Ｓ，Ｗａｎｇ Ｙ Ｈ ｅｔ ａ１．Ｔｗｏ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｓｕｂｓｅｔｓ ｏｆ ＦＯＸＰ３ ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ ｇｈ Ｔｒｅｇ细胞比ＦＯＸＩ￣ ＩＣＯＳ ￣ｗ￣ＨＪ胞对 ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｔｈｙｍｕｓ ａｎｄ ｐｅｒｉｐｈｅｒｙ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２００８； ２８：８７０．８８０． 效应Ｔ细胞有着更强的抑制作用。同时，这群细胞 ５萧树乐，许国铭主编．中华胃肠病学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社， ２０吣：４９３４舛． 还高表达Ｆａｓ、Ｆ嬲Ｌ和Ｇｒａｎｚｙｍｅ Ｂ，可能对Ｔｒｅｇ诱导 ６ Ｗｏｏ Ｅ Ｙ，Ｃｈｕ Ｃ Ｓ，Ｇｏｌｅｔｚ Ｔ Ｊ ｅｔ ａ１．Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｕｍｏｒｓ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｅａｒｌｙ—ｓｔａｇｅ ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｎａｄ ｌａｔｅ— ＣＩＭ 和ＣＤ８ 细胞凋亡中发挥重要的作用＿１ ， ｊ。 ｓｔｇａｅ ｏｖａｒｉｎａ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２００１；６１：４７６６－４７７２． ７ Ｌｉｙａｎａｇ￣Ｕ Ｋ，Ｍｏｏｒｅ Ｔ Ｔ，Ｊｏｏ Ｈ Ｃ ｅｔ ａ／．Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｆｏ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｓ 目前在ＣＲＣ组织中是否存在ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ和 ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｅｅｄ ａｎｄ［Ｈｌｎｏｒ ｒｒｎｃｒｏｅｎｖｉｏｒｎｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐａｎｃｒｅａｓ ｏｌ＂ｂｒｅａｓｔ ａｄｅｎｏｃａｅｒ￣［Ｊ］．Ｊ ｈｍ￣ｎｏｌ，２０眩；１６９：２７５６－２７６１． ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ—Ｔｒｅｇ两种细胞亚群尚不明确。本实 ８ Ｃｕｒｉｅｌ Ｔ Ｊ，Ｃｏｕｋｏｓ Ｇ，Ｚｏｕ Ｌ ｅｔ ａ１．Ｓｐｅｃｉｉｆｃ ｒｅｃｒｕｉａｎｅｎｔ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｏｖａｒｉｎａ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｆｏｓｔｅｒｓ ｉｍｍｕｎｅ ｐｒｉｖｉｌｅｇｅ ａｎｄ ｐｒｅｄｉｃｔｓ ｒｅｄｕｃｅｄ 验采用双重酶标免疫组化技术同时检测ＣＲＣ组织 ｓｕｎｉｖａｌｌＪｊ．Ｎａｔ， Ｍｅｄ，２００４；１０：９４２．９４９． 中ＦＯＸＰ３和ＩＣＯＳ表达，结果发现ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ ９ Ｖｉｇｕｉｅｒ Ｍ，Ｌｅｍａｉｔｒｅ Ｆ，Ｖｅｒｏｌａ Ｏ ｅｔ ａ１．ＦＯＸＰ３ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ＣＤ４ ＣＤ２５ｈｉｓｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｎｓ ａｒｅ ｏｖｅｒｒｅｐｒｅｓｅｎｔｄｏ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ Ｔｒｅｇ在ＣＲＣ组织中的表达率明显高于癌旁组织中 ｍｅｌｎａｏｍａ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ Ｔ ｃｅＨｓ［Ｊ］． Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００４；１７３：１４４４—１４５３． 的表达率。提示表达ＩＣＯＳ分子的Ｔｒｅｇ可能具有更 １０ ＷａｎｇＨＹ，ｌｅｅＤ Ａ，Ｐｅ哩Ｇ ｅｔ ａ１．Ｔｕｍｏｒ－ｓｐｅｃｉｉｆｃ ｈｕｍａｎ ＣＤ４ ｒｅｇｎｌａ— ｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｌｉｇａｎｄｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｉｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ［ＪＪ．Ｉｍｍｕ一 强的免疫抑制功能。我们将在今后实验中，进一步 曲ｔｖ，２ＯＯ４；２０：１Ｏ７．１１８． 深入研究ＦＯＸＰ３ ＩＣＯＳ Ｔｒｅｇ详细分子作用机制。 １１ Ｗａｎｇ Ｈ Ｙ．Ｐｅｎｇ Ｇ．Ｇｕｏ Ｚ ｅｔ ａ／．Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ ＡＲＴＣｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｌｉｇａｎｄ ｕｎｉｑｕｅｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ａｎｔｉｇｅｎ—ｓｐｅｃｉｉｆｃ ＣＤ４ ｒｅｇｎ－ 以上结果显示ＣＲＣ的发生发展与其癌组织局部 ｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓｌＪｊ．Ｊ Ｉｍｌｎｎｎｏｌ，２０ｏ５；１７４：２６６１－２６７０． １２ Ｉｍａｉ Ｎ．Ｉｋｅｄａ Ｈ．Ｔａｗａｒａ Ｉ ａ／．Ｔｕｍｏｒ ｐｒｏ！￣＇ｅｓｓｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ 微环境中Ｔｒｅｇ数量变化有直接关系，ＩＣＯＳ的表达可能 ｏｆ ｍｕｈｉｏｆｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｖ ｉｎ ａｄｏｐｔｉｖｅｌｙ ｔｒｎａｓｆｅｒｒｅｄ ｔｕｍｏｒ－ｓｐｅｃｉｉｆｃ ＣＤ８ Ｔ ｃｅＨｓ】Ｊ Ｉ．Ｅａｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２ＯＯ９；３９：２４１．２５３． 在调解Ｔｒｅｇ功能方面起重要作用，ＣＲＣ患者的肿瘤微 １３ Ｐ ｉｔｔ ｅｔ Ｍ Ｊ．Ｂｅｈａｆｉｏｒ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｐｌａｙｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ［１ｌｌｎｏｒ ［Ｊ］．Ｃｕｒｒｅｎｔ ０ｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２００９；２１：５３—５９． 环境可能通过某种机制促进了Ｔｒｅｇ的分化或增殖。 １４ Ｍｉｌｌｅｒ Ａ Ｍ．Ｌｕｎｄｂｅｒｇ Ｋ．Ｏｚｅｎｃｉ ｅｔ ａ１．ＣＩＭ Ｃ０２５ｈｉ曲Ｔ ｃｅＨｓ ａｒｅ ｅｎ— ｒｉｅｈｅｄｉｎｔｈｅｔｕｍｏｒ ａｎｄ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓｌ Ｊ！． ４参考文献 Ｊ Ｉｎｌｍｕｎｏｌ，２００６；１７７：７３９８． ． １５ Ｓｔｒａｕｓｓ Ｌ．Ｂｅｒｇｍａｎｎ Ｃ．Ｓｚｃｚｅｐａｎｓｋｉ Ｍ Ｊ ｅｔ ａ／．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆＩＣＯＳ ｏｎ １ Ｈｏｒｉ Ｓ，Ｎｏｍｕｒａ Ｔ，Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｓ．Ｃｏｎ ｔｒｏｌ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｈｕｍａｎ ｍｅｌａｎｏｍａ－ｉｎｆｉｈｒａｔｉｎｇ ＣＩＭ ＣＤ２５ｈｉ Ｆ０ＸＰ３ Ｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｊ１ｓ： ｂｖ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ＦＯＸＰ３［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００３；２９９：１０５７－１０６１． ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｉｍｐａｃｔ ｏｎ ｔｕｍｏｒ－ｍｅｄｉａｔｄｏ ｉｍｕｎｅ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌ Ｊ ｊ Ｊ ２ Ｆｏｎｔｅｎｏｔ Ｊ Ｄ，Ｇａｖｉｎ Ｍ Ａ，Ｒｕｄｅｎｓｋｙ Ａ Ｙ．ＦＯＸＰ３ ｐｒｏｇｒａｍｓ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐ－ Ｉｒｍｎｕｎｏｌ，２ｏ０８；１８０（５）：２９６７—２９８０． ｍｅｎｔ ａｎｄ ｆｎｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４ ＣＩＹ２５ ｒｅｇｎｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅＵｓ［Ｊ］．Ｎａｔ Ｉｎｎｎｕｎｏｌ， ２００３；４：３３０—３３６． ３ ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔ ｒＫｈａｔｔｒｉ Ｒ，Ｃｏｘ Ｔ，Ｙａｓｅｇｕｌａｔａｙｋｏ Ｓ Ａ ｅｏｒｙ ｃｅｌｌｓｌＪｊ．ｔ ａ１．Ａｎ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｆｏｒ Ｓｃｕｒｆｉｎ ｉｎ ［收稿２００９—０６—２０修回２００９—０７．３０］ Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００３；４：３３７—３４２． （编辑倪鹏） （上接第６９页） ４参考文献 ７ Ｋｉｎｌ Ｊ Ｋ．Ｃｈｏｉ Ｅ Ｍ．Ｓｈｉｎ Ｈ Ｉ ａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉ． ｂｏｄｙ ｓｐｅｃｉｉｆｃ ｔｏ ｈｔｅ Ｚ３９Ｉｇ ｐｒｏｔｅｉｎ，ａ ｍｅｍｂｅｒ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｓｕｐｅｒｆａｍｉ一 １ Ｄａｎｇｎａｅｓｅ Ｋ，Ｃｏｌｌｅａｎｘ Ｌ，Ｋ１ｏｏｓ Ｄ Ｕ ｅｔ口Ｚ．Ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆＺ３９Ｉｇ，ａ ｎｏｖｅｌ ｇｅｎｅ １ｖＩ Ｊ Ｉ．Ｉｍｍａｎｏｌ Ｌｅｔｔ，２００５；９９（２）：１５３—１６１． ｔｈ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ—ｌｉｋｅ ｄｏｎｍｉｎｓ ｌｏｅａｔｅｄ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ＸＩ Ｊ｛． ８ Ｊ Ｑ．ｗｉｅｓｍａｎｎ Ｃ．ｖａｉｌ Ｌｏｏｋｅｒｅｎ Ｃａｍｐａｇｎｅ Ｍ．Ａ ｒｏｌｅ ｏｆ ｍａｅｒｏｐｈａｇｅ Ｂｉｏｃｈｉｍ ＢｉｏＤｈｙｓ Ａｃｔａ，２０ｏｏ；ｌ４ｑ２（２．３）：５２２—５２５． ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＣＲＩｇ ｉｎ ｉｍｍｕｎｅ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ａｌ１ｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｌ Ｊ【．Ｍｏｌ ２ Ｈｅｌｍｙ Ｋ Ｙ．Ｋａｔｓｃｈｋｅ Ｋ Ｊ Ｊｒ．Ｇｏｒｇａｎｉ Ｎ Ｎ ｅｌ ａ１．ＣＲＩｇ：ａ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｌｍｍｍｌｏ１．２ｏ０８；４５（１６）：４０４１－４０４７． ｃ ｏｍ ｐｌｅｍｅｎｔ ｒｃｅｅｐｔｏｒ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ ｏｔ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ９ ｖａｎ Ｌｏｏｋｅｒｅｎ Ｃａｍｐａｇｎｅ Ｍ，Ｗｉｅｓｎｒａｎｎ Ｃ，Ｂｒｏｗｎ Ｅ Ｊ ｅｔ ａ１．Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｌＪＪ．Ｃｅｌｌ，２００６；ｌ２４（５）：９ｌ５－９２７． ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｃｌｅａｒａｎｃｅｌＪｊ．Ｃｅｌｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０（Ｊ７；９ ３ 、『ｆ１ Ｌ＇Ｓｃｈｍｉｔｚ Ｎ，ＫｍＴｅｒ Ｍ ０ ｅｔ ａ１．ＶＳ【Ｃ４，ａ Ｂ７ ｆｍｎｉｌｙ．ｒｅｌａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ， （９）：２０９５—２ｌｏ２． ｉｓ ａ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｏｆ Ｔ ｅｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｌ Ｊｊ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ，２００６；１１６ １０ Ｋａｔｓｃｈｋｅ Ｋ Ｊ Ｊｒ．Ｈｅｌｍｙ Ｋ Ｙ．ＳｔｅｆｆｅｋＭ ｅｔ ａ１．Ａ ｎｏｖｅｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆｔｈｅ ａｌ— （１０）：２８１７—２８２６． ｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｐａｔｈｗａｙ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｒｅｖｅｒｓｅｓ ｉｎｆｌａｗａｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｄｅｓｔｎｉｅ— ４ ＺａｎｇＸ， ｌｉｓｏｎ Ｊ Ｐ．Ｔ０ ｂｅ ｏｒ ｎｏｔ ｔｏ ｂｅ Ｂ ｌ Ｊ Ｊ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ，２０ｏ６；ｌｌ６ ｔｉｏｎ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｒｔｈｒｉｔｉｓｌ Ｊｊ．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ，２０ｏ７；２０．４（６）：１３１９．１３２５． （１０）：２５９０．２５９３ Ｉ１张世杰，王蕾，壬月颖 ｎ ．人ｖｓＩＧ４基因转染细胞的构建及 ５ ＷａＪｋｅｒ Ｍ Ｇ．Ｚ３９１ｇ ｉｓ ｃｏ—ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｗｉｈｔ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｏａｅｒｏｐｈａｇｅ ｇｅｎｅｓｌＪ Ｊ 其对Ｔ细胞的共刺激效应的初步研究［Ｊ］．中国免疫学杂志，２【ｘ）９； Ｂｉ￣ｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ，２００２；１５７４（３）：３８７ ３９ｏ． ２５（５）：３９７—４０１． ６ Ｌｅｅ Ｍ Ｙ，Ｋｉｎｌ Ｗ Ｊ．Ｋａｎｇ Ｙ Ｊ ｅｔ ａ ．Ｚ３９Ｉｇ ｉｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｏｎ ｍａｅｍｐｈａｇｅｓ ａｎｄ ｍａｙ ｍｅｄｌａｔｅ ｉｍｑａｍｎｍｔｏｒｙ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｌＪ』．Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ，２ｏｏ６；ｓ０（４）：９２２—９２８． ［收稿２００９—０２—１０修回２０ｏ９ ０６—２９］ （编辑倪鹏） （上接第７４页） ６ Ｚｈａｎｇ Ｋ，Ｌｉ Ｘ，Ｙｉｎ Ｇ ｅｔ ａ１．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＩＭ ＣＤ２５ Ａｂｕ—Ｇｈａｚａｌｅｈ Ｒ，ＫａｂｉＴ Ｊ．Ｊｉａ Ｈ ａ ．Ｓｒｃ ｍｅｄｉａｌｅｓ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｂｖ ｖａｓｃｕ— ｒｅｇｕｌａｔｏｕ＂Ｔ ｃｅｌｌｓ ｄｉｌｆｅｒｅｎｔｉａｔｏｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｆｎ）ｍ ｂｏｎｅ ＩｎＯＩＴＯＷ．ｄｅｆｔｖｅｄ ｌａｒ Ｅｎｄｏｌｈｅｌ＿ａ１舯ｗｔｈ ｆ ｔ（ ０ｆ ｔｈｅ ｐｈ（＇ｓｐｈｏｒｖＩａ＿ｆ ｎ ０ｆ ｆｏｃａｌ ａ（Ⅱ１ｅｓｉ Ｌ｝【ｌ ｋｉ— ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｐ￣ｒｉａｓｉｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａ ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ山ｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒ Ｊ ｊ． ｎａｓｅ ａｔ ｔｖｒ（Ｊｓｉｎｅ ８６ｌ，锄ｄ瑚ｊ ｒｄｔｉ０ｎ ａｎｄ ａｎｔｉ．ａｐ０ｐｔ０ｓｉｓ ｉｎ ｅ｜Ｉｄ０ｔｈｅ１ｉａｌ ｃｅ儿ｓ Ｂｒ Ｊ Ｄｅ￣ｎａｔｏｌ，２００８；１５８（２）：２９８—３０５． ｌＪ ｉ．Ｂｉｏｃｈｅｍ，２ｏｏｌ；３６０（１）：２５５—２６４． ７ Ｚｈａｎｇ Ｋ，Ｚｈａｎｇ Ｒ，“Ｘ ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｔｕＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｎｅｔｈｙｌａ． 【）Ｌｌａｎ Ｈ Ｘ，Ｃｈｅｎｇ Ｌ Ｍ，Ｗａｎｇ Ｊ ｎ ．Ａｎ彝ｏｇｅｎｉｃ ｐｆ）ｆｅｎｔ ｄ珊 ｒｅｎｃｅ １）ｅ． ｔｉｏｎ ｓｔａｔｌｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐ１６ ｇｅｎｅ ｉｎ ｃｏｌｏｎ），一ｆｏｒｍｉｎｇ ｃｅＨｓ ｗｉｔ｝ｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ＤＯ． ｔｗｅｅｎ ｔｗ０ ｔｖｐｅｓ ｎｆ ｅｎｄ０出ｅｌ ｐｒｆ】 ｎｉｔ【ｌｒ ｃｅｌｌｓ ｆｍｌｍ ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｆｄ ｔｅｎｔｉａｌ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｈｔ ｐ ａｓｉｓｌＪ ｊ．Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｄｅｒｎｎｔｏｌ，２０Ｏ７；３２（６）：７０２－７￣． ｂｌｏｏｄＩ Ｊ Ｉ．Ｃｅ１ｌ Ｂｉ（）ｌ Ｉｎｔ，２０ｏ６；３Ｏ（１２）：１０ｌ８．１０２７． ８牛旭平，徐海涛，尹圆华ｅｔ ａｌ银屑病患者单一核细胞培养上清对 Ｐａｒｋ Ｓ，Ｔ ｐｐｅｒ ０ Ｍ，Ｇ ａＩｉａｎ０ Ｒ Ｄ Ｓｅｋｃｔｉｖｅ ｒｅｃｍｉｔｍｅｎｔ ｏｆ ｅ盯ｄ【）ｔｈｅ— 骨髓造血干细胞和祖细胞集落形成的影响［Ｊ］．中华皮肤科杂志， ｌ河ｐｒｏ １ｉｔ【ｌｒ ｃｅｌｌｓ ｔ０ ｓｃｈＰＪＩ ｃ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｉ｝ｈ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｎｅｏｖａｓｃｕｌ ｚａｔｉｏｎ ２【Ｘ）６：３９（３）：１４３—１４５ ｌＪ Ｊ．ＰＩａｓｔ Ｒｅｃ０ｎｓｔｒ Ｓｕｒｇ，２ｏ（）４；ｌ１３（１）：２８４ ２９３． ９张瑞丽，牛旭平，李新华ｅｔ ａ１．银屑病患者骨髓ＣＦＵ—ＨＰＰ集落形成 Ｄｅｖｉｎｅ Ｓ Ｍ，Ｃ０ｈｈｓ Ｃ，Ｊｅ咖ｉｎ鼬Ｍ ．Ｍｅｓｅｎｃｈｖｍａ１ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｄｉｓ— 及集落细胞ｐ１６基因启动子甲基化的研究［Ｊ］．中国实验血液学杂 ｔｄｈｕｔｅ ｌｏ ａ ｅ ｒａｎ ０ｆ ｔｉｓ刚ｅｓ ｆｎｌｌ０ ｎｇ ｓｖｓｔｅ ｃ ｉ ｎｆｈｓｉｏｎ ｉｎｌ０ ｎ（ｍｈｕ— 志，２（）【）７：１５（４）：７８０—７８４． ｍａｎ ｐ １ａｔｅｓＩ Ｊ．Ｂｌ０ｏｄ，２００３；１Ｏｌ（８）：２９９９ ３ｏｏ１． １Ｏ Ｌｅ Ｂｌｎａｃ Ｋ，ＴａＪ１ｍａｉｋ Ｃ．Ｒｏｓｅｎｄａｈｌ Ｋ ｅｔ ａ１．ＨＩ｜Ａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍｍｌｏ． １ｏｇｉｃ ｐｒｏｐｅ￣ｉｅｓ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉｅｔｅｄ ａｎｄ ｕｎｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍ￣ｓｔｃｎｌ ｃｅｌｔｓｌＪ Ｊ．Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ，２００３；３１（１Ｏ）：８９０—８９６． ［收稿２（ｘ）９一（）７．２５修回２０ｏ９一ｌｌ一０２］ （编辑许四平）
