・４２・ 湖北中医药大学学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０１５年４月第１７卷第２期 Ａｐｒｉｌ ２０１５，Ｖｏ１．１７，Ｎｏ．２ 【药学研究】 合欢皮水提物不同部位的急性毒性比较研究 田微 ，叶小敏 ，杨德森 ，干国平 （１．湖北中医药大学，湖北武汉４３００６５；２．武汉药品医疗器械检验所，湖北武汉４３００７５） 摘要：目的 对合欢皮水提取物分离纯化后各部位进行急性毒性观察与评价，为后期抗焦虑药效实验给药剂量的 确定提供依据。方法采用急性毒理学研究的方法探究合欢皮水提取物分离纯化后各部位对小鼠的毒性剂量；应用 按含生药量计算，合欢皮水提取物由Ｄ１０１大孔树脂 最大耐受量法测定各个部位的最大给药量或最大耐受量。结果柱分离得到的以下部位最大耐受量分别为：水部位（Ｄ—Ｈ２０）１３４３．２０ｇ／ｋｇ；４０％乙醇部位（Ｄ一４０ＥｔＯＨ）ｌ１７８．５８ｇ／ｋｇ； ９５％乙醇部位（Ｄ一９５ＥｔＯＨ）９９．９４ｇ／ｋｇ；其中４０％乙醇部位经过ＳＫＰ反相树脂柱分离得到的以下部位最大耐受量或最 大给药量分别为：４０％甲醇部位（Ｓ一４０ＭｅＯＨ）５３１．１５ｇ／ｋｇ；７５％甲醇部位（Ｓ一７５ＭｅＯＨ）２８９８．４０ ｋｇ；９０％甲醇部位（Ｓ 一９０ＭｅＯＨ）４７５０６．５２ｇ／ｋｇ。结论合欢皮水提取物经分离纯化后所得到的６个化学部位，最大耐受量或最大给药量 均不同。由ＤＩＯ１大孔树脂柱分离所得３个部位中，９５％乙醇部位的最大耐受剂量明显低于水部位及４０％乙醇部位， 其毒性最大；４０％乙醇部位经过ＳＫＰ反相树脂柱分离得到的３个部位中，４０％甲醇部位最大耐受量明显低于７５％甲醇 部位及９５％甲醇部位。４０％乙醇部位的毒性成分可能主要转移至４０％甲醇部位。 关键词：合欢皮；水提取物；急性毒性 中图分类号：Ｒ２８５ 文献标识码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８—９８７ｘ．２０１５．０２．１４ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ａｃｕｔｅ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ Ｄｉｆｅｒｅｎｔ Ｐａｒｔｓ Ｆｒｏｍ Ｗａｔｅｒ Ｅｘｔｒａｔｓ ｏｆ Ａｌｂｉｚｚａ Ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ Ｂａｒｋ ＴＩＡＮ Ｗｅｉ ，ＹＥ Ｘｉａｏｍｉｎ ，ＹＡＮＧ Ｄｅｓｅｎ ，ＧＡＮ Ｇｕｏｐｉｎｇ （１．Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｗｕｈａｎ ４３００６５；Ｗｕｈａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ａｎｄ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｅｖｉｃｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｗｕｈａｎ ４３００７５） Ａｂｓｔｒａｃｔｓ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ａｎｄ ｐｕｒｉｉｆｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｌｂｉ— ｚｚａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ ｂａｒｋ．Ｉｔ ｃａｎ ａｌｓｏ ｇｉｖｅ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ａｎｘｉｏｌｙｔｉｃ—ｌｉｋｅ ｔｅｓｔ．Ｍｅｔｈｏｄ Ｕｓｉｎｇ ｃｌａｓｓｉｃ ｒｅｓｅａｒｃｈｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｔｏｘｉｃ ｄｏｓｅ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ａｎｄ ｐｕｒｉｉｆｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｌｂｉｚｚａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ ｂａｒｋ．Ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｄｏｓｅ ｏｒ ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓｅ ｏｆ ｅａｃｈ ｐａｒｔｓ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓｅ（ＭＴＤ）ｒｅｓｅａｒｃｈｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｓｔ Ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓｅｓ ｏｒ ｍａｘｉｍｕｍ ｄｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｌｂｉｚｚａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ ｂａｒｋ ｅｌｕｔｅｄ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ＤＩＯ１ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎ ａｒｅ ａｓ ｔｈｅ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ：ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｐａｒｔ（Ｄ一 ０）ｉｓ １３４３，２０ ｇ／ｋｇ；ｔｈｅ ４０％ｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ（Ｄ一４０ＥｔＯＨ）ｉｓ １１７８．５８ ｇ／ｋｇ； ｔｈｅ ９５％ｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ（Ｄ一９５ＥｔＯＨ）ｉｓ ９９．９４ ｇ／ｋｇ；Ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓｅｓ ｏｆｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｒｆｏｍ ｔｈｅ ４０％ｅｔｈａｎｏｌ ｐａｔｒ ｅｌｕｔｅｄ ａｆ－ ｔｅｒ ＳＫＰ ＲＰ ｒｅｓｉｎ ａｒｅ ａｓ ｔｈｅ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ：ｔｈｅ ４０％ｍｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ（Ｓ一４０ＭｅＯＨ）ｉｓ ５３１．１５ ｇ／ｋｇ；ｔｈｅ ９５％ｍｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ（Ｓ一７５ＭｅＯＨ）ｉｓ ２８９８．４０ ｋｇ；ｔｈｅ ９０％ｍｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ（Ｓ－９０ＭｅＯＨ）ｉｓ ４７５０６．５２ ｇ／ｋｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｄｏｓｅ ｏｒ ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｘ ｐａｒｔｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ａｎｄ ｐｕｒｉｉｆｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｌｂｉｚｚａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ ｂａｒｋ ａｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．Ｉｎ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｐａｒｔｓ ｅｌｕｔｅｄ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ Ｄ１０１ ｍａｃｒｏ— ｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎ，ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓｅ ｏｆ ９５％ｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ ｉｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ４０％ｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ ｏｒ ｗａｔｅｒ ｐａｒｔ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ａｎｄ ｉｔ ｓｈｏｗｓ ｔｈｅ ｌａｒ－ ｇｅｓｔ ｔｏｘｉｃｉｔｙ；ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｎ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｐａｒｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ４０％ｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ ｅｌｕｔｅｄ ａｆｔｅｒ ＳＫＰ ＲＰ ｒｅｓｉｎ，ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓｅ ｏｆ ４０％ｍｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ ｉｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ７５％ｍｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ ｏｒ ９５％ｍｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ．Ｔｈｅ ｔｏｘｉｃ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｍｉｇｈｔ ｂｅ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ４０％ｅｔｈａｎｏｌ 基金项目：国家自然科学基金面上项目（８１２７４０６９），湖北省教育厅科研重点项目（Ｄ２０１１２００５）。 作者简介：田微（１９８８一），女，湖北中医药大学２０１２级硕士研究生，研究方向：中药药效物质研究。 通讯作者：干国平（１９６５一），男，湖北中医药 学教授，研究方向：中药药效物质研究，Ｅ—ｍａｉｌ：５１０５７７３１９＠ｑｑ・ｃ。ｍ。 ２０１５年４月第ｌ７卷第２期 Ａｐｒｉｌ ２０１５，Ｖｏ１．１７，Ｎｏ．２ 湖北中医药大学学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ・４３・ ｐａｒｔ ｔｏ ｔｈｅ ４０％ｍｅｔｈａｎｏｌ ｐａｒｔ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｌｂｉｚｚａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ ｂａｒｋ；ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｔ；ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ 合欢皮为豆科植物合欢Ａｌｂｉｚｚａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ Ｄｕｒａｚｚ．的树皮。 《中国药典》记载合欢皮具有解郁安神，活血消肿之功效，用于 悬液（Ｄ一９５ＥｔＯＨ～Ｈ、Ｄ一９５ＥｔＯＨ—Ｍ、Ｄ一９５ＥｔＯＨ—Ｌ）；Ｓ一 ４０ＭｅＯＨ部位加水稀释成３９．８４ｇ／ｍＬ、２６．５６ｇ／ｍＬ、１３．２８ｇ／ｍＬ 的系列溶液（Ｓ一４０ＭｅＯＨ—Ｈ、Ｓ一４０ＭｅＯＨ—Ｍ、Ｓ一４０ＭｅＯＨ— Ｌ）；Ｓ一７５ＭｅＯＨ部位加适量吐温一８０及水稀释成７２．４６ ｍＬ 的混悬液（此浓度为能通过小鼠灌胃器的最大浓度）；Ｓ一 心神不安、忧郁失眠、肺痈疮肿、跌扑伤痛…。合欢皮中主要含 有三萜皂苷、黄酮、木脂素等多类型化学成分 。药理研究显 示，合欢皮水提取物 Ｊ、合欢皮二氯甲烷提取物 均具有明显 的抗焦虑作用。本课题组为了较系统地研究合欢皮抗焦虑药 效物质基础，将合欢皮水提物采用Ｄ１０１大孑Ｌ吸附树脂柱及ＳＫＰ 反相树脂柱分离得到多个化学部位，本文对各化学部位进行了 急性毒性观察与评价。 １材料与方法 １．１仪器与试荆 ＢＳＩ１０Ｓ型电子分析天平（德国赛多利斯集团提供），ＦＤ８— ４型冻干机（美国ＳＩＭ公司提供），ＦＷ１７６型中药草粉碎机（天 津泰斯特仪器公司提供），ＲＥ一１００１旋转蒸发仪（郑州长城科 工贸有限公司提供），ＤＬＳＢ一５型低温冷却循环泵（郑州长城科 工贸有限公司提供），ＳＨＢ—ｍ型循环水式真空泵（郑州长城科 工贸有限公司提供），Ｄ１０１型大孑Ｌ吸附树脂（西安蓝晓科技有 限公司提供），ＳＫＰ聚合树脂（济南博纳生物技术有限公司提 供，批号２０１３０５１８），吐温一８０（国药集团化学试剂有限公司提 供）。 １．２药材与样品 合欢皮药材：由武汉市武昌药材公司提供，产地为江西南 昌，经本校生药教研室潘宏林教授鉴定为豆科植物合欢的干燥 茎皮。 本课题组前期已对合欢皮水提取物分离纯化工艺进行了研 究，基本流程如下：合欢皮药材一水提取一蛋清除鞣质一Ｄ１０ｌ大 孔树脂吸附（依次用水、４０％，９５％乙醇洗脱）一水部位、４０％乙醇 部位、９５％乙醇部位（以下简称Ｄ—Ｈ２０、Ｄ一４０ＥｔＯＨ、Ｄ一 ９５ＥｔＯＨ），取Ｄ一４０ＥｔＯＨ部位一ＳＫＰ反相树脂柱吸附（依次用 ４ｏ％、７５％、９０％甲醇洗脱＿）ｕ 得到４０％ＭｅＯＨ部位、７５％ＭｅＯＨ 部位、９０％ＭｅＯＨ部位（以下简称Ｓ一４０ＭｅＯＨ、Ｓ一７５ＭｅＯＨ、Ｓ一 ９０ＭｅＯＨ），上述６个部位浓缩成浸膏，浓度（以生药浓度计ｇ生 药／ｇ浸膏）依次为：６０．８４ ｇ／ｇ、７０．３４ ｇ／ｇ、５８．９０ ｇ／ｇ、１０２．４４ｇ／ｇ、 ７９．３０ｇ／ｇ、１８４６．８４ ｇ／ｇ。以上６个部位，冷冻干燥成冻干粉，浓度 （以生药浓度计ｇ生药／ｇ浸膏）依次为：７７．２２ｇ／ｇ、８９．７５ｇｉｇ、 ７５．８１ｇ／ｇ、１２５．７８ ｇ、１１１．１６ｇ／ｇ、２１９１．９６ｇ／ｇ。 每个部位按照急性毒性预实验结果，依次配制成不同浓度 （按照生药浓度配置为ｇ生药／ｍＬ）如下：Ｄ—Ｈ：０部位加水稀释 成５０．３７ｇ／ｍＬ、４１．９８ｇ／ｍＬ、３３．５８ｇ／ｍＬ的系列溶液（Ｄ—Ｈ２０一 Ｈ、Ｄ—Ｈ，０一Ｍ、Ｄ—Ｈ，０一Ｌ）；Ｄ一４０ＥｔＯＨ部位加水稀释成 ４９．２５ｇ／ｍＬ、３２．８３ｇ／ｍＬ、１６．４２ ｇ／ｍＬ的系列溶液（Ｄ一４０ＥｔＯＨ— Ｈ、Ｄ一４０ＥｔＯＨ—Ｍ、Ｄ一４０ＥｔＯＨ—Ｌ）；Ｄ一９５ＥｔＯＨ部位加适量吐 温一８０及水稀释成４．９９ｇ／ｍＬ、３．３３ｇ／ｍＬ、２．５０ｇ／ｍＬ的系列混 ９０ＭｅＯＨ部位加适量吐温一８Ｏ及水稀释成ｌ １８７．８０ｇ／ｍＬ的混 悬液（此浓度为能通过小鼠灌胃器的最大浓度）。 对照组除设蒸馏水组外，另设置蒸馏水一吐温组，即取蒸馏 水加适量的吐温一８Ｏ研磨均匀制成混悬溶液（每ｌＯｍＬ加入 ０．２５ｍＬ吐温） 。 １．３ 实验动物 ＩＣＲ小鼠１６０只，ＳＰＦ级别，雌雄各半，体重在１８—２２ｇ，由 湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，生产许可证号：ＳＣＸＫ （湘）：２０１１—０００３。 动物饲养于武汉药品医疗器械检验所ＳＰＦ动物房中，使用 许可证号：ＳＹＸＫ（鄂）：２０１４—００７７。饲养温度２０—２２℃，相对 湿度为４５％一６８％，１２小时的明暗周期。 １．４ 方法 １．４．１实验方法：取上述规格小鼠１６０只，随机分为各个提取 部位的药物组和对照组，每组１０只，雌雄各半，禁食１６ｈ后分别 按４０ｍＬ／ｋｇ体重的给药体积每日给药１次。各部位的给药剂 量（按照动物体重配制的生药浓度即ｇ生药／ｋｇ体重）如下：Ｄ— Ｈ２０一Ｈ、Ｄ—Ｈ２０一Ｍ、Ｄ—Ｈ２０一Ｌ（２０１４．８０嚣／ｋｇ、１６７９．００ｇ／ｋｇ、 １３４３．２０ｇ／ｋｇ）：Ｄ一４０ＥｔＯＨ—Ｈ、Ｄ一４０ＥｔＯＨ—Ｍ、Ｄ一４０ＥｔＯＨ— Ｌ（１７６７．８８ｇ／ｋｇ、１ １７８．５８ｇ／／ｋｇ、５８９．２９ｇ／ｋｇ）；Ｄ一９５ＥｔＯＨ—Ｈ、Ｄ 一９５ＥｔＯＨ—Ｍ、Ｄ一９５ＥｔＯＨ—Ｌ（１９９．８８ｇ／ｋｇ、１３３．２５ｇ／ｋｇ、９９． ９４异／ｋｇ）；Ｓ一４０ＭｅＯＨ—Ｈ、Ｓ一４０ＭｅＯＨ—Ｍ、Ｓ一４０ＭｅＯＨ—Ｌ （１５９３．４ ｋｇ、１０６２．３０ｇ／ｋｇ、５３１．１５ ｋｇ）；Ｓ一７５ＭｅＯＨ（２８９８． ４０ ｋｇ）；Ｓ一９０ＭｅＯＨ（４７５０６．５２ｇ／ｋｇ）。给药组和对照组分别灌 胃给予上述供试药物和对照溶液。观察给药后的即时毒性反应 和１４ｄ内的存活情况。 １．４．２统计学方法：采用ＳＰＳＳ１８．０统计软件进行分析，对计量 资料的各项指标评定的分值采用均数±标准差（ ±ｓ）表示，各 组之间的均数差异进行Ｏｎｅ—Ｗａｙ ＡＮＯＶＡ分析。 ２结果 ２．１ 动物中毒现象 对小鼠一般体征的影响：所有小鼠均出现腹泻现象，未死亡 动物次日腹泻现象消失；中毒动物共同表现为尾部青紫，尤其是 尾尖部现象特别明显；给药后行动迟缓甚至出现步履不稳的运 动失调现象；腹部贴地，静卧不动；呼吸异常，喘气；眼角有分泌 物，无色，其中Ｄ—Ｈ Ｏ—Ｍ、Ｄ—Ｈ Ｏ—Ｈ组动物眼角有分泌物， 且分泌物为红色，而其他组无此中毒症状；Ｄ一４０ＥｔＯＨ—Ｈ组动 物出现嘴角有分泌物、抽搐的现象；Ｄ一４０ＥｔＯＨ—Ｌ组动物虽无 湖北中医药大学学报 ・２０１５年４月第１７卷第２期 Ａｐｒｉｌ ２０１５，Ｖｏ１．１７，Ｎｏ．２ ４４・ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 死亡，但是也有中毒症状，表现为眼有分泌物，腹部贴地，精神萎 靡。自发活动减少，且次日恢复正常；Ｓ一４０ＭｅＯＨ—Ｍ、Ｓ一 Ｈ２０一Ｍ、Ｄ—Ｈ２０一Ｈ；Ｄ一４０ＥｔＯＨ—Ｈ；Ｄ一９５ＥｔＯＨ—Ｍ、Ｄ一 ９５ＥｔＯＨ—Ｈ：Ｓ一４０ＭｅＯＨ—Ｍ、Ｓ一４０ＭｅＯＨ—Ｈ部位均可导致不 ４０ＭｅＯＨ—Ｈ组中毒症状类似Ｄ一４０ＥｔＯＨ，均有嘴角有分泌物、 抽搐的现象；Ｓ一７５ＭｅＯＨ、Ｓ一９０ＭｅＯＨ两组小鼠虽未见死亡，但 同数量的动物死亡，且其死亡的数量与相应的剂量成正比。此 外，不同部位不同剂量组的雄性动物１４ｄ增重与相应对照组比 较，统计学的差异见表１、表２。 也出现了活动减少的症状，其他症状不明显。 ２．２动物死亡情况和给药后体重变化情况 动物的死亡情况及体重变化由表１、表２可见，给药后Ｄ— 表１ 经Ｄ１０１大孔树脂分离组分给药前后动物体重变化及死亡情况表 增减率是指第ｌ４天与初始体重相比的增减率，与对照组比较， Ｐ＜０．０５，｝｝Ｐ＜Ｏ．０１。 表２经ＳＫＰ反相树脂分离组分给药前后动物体重变化及死亡情况表 增减率是指第１４天与初始体重相比的增减率，与对照组比较 Ｐ＜０．０５．｝ Ｐ＜０．０１。 ２．３对心、肝、脾、肺、肾、胃等主要器官的影响 ３讨论 将给药后死亡实验动物进行大体解剖，大部分动物胃及小 肠高度充盈，并可见气泡，其他器官未见异常。实验结束后，将 合欢皮水提取物经过分离纯化后给药的动物均出现不同 程度的腹泻现象，且恢复较快，与文献报道一致 ，各种中毒症 状可能与自主神经、中枢神经等神经系统有关，大体解剖肉眼未 见其他器官有异常病变；出现自发活动减少等症状可能与其抗 焦虑药理作用有关 ’ 。 剩余动物处死并进行大体解剖，各组动物的心、肝、脾、肺、肾、胃 等主要器官均未见异常。 ２．４各部位的最大耐受量／最大给药量 Ｄ—Ｈ２０最大耐受量为１３４３．２０ｇ／ｋｇ；Ｄ一４０ＥｔＯＨ最大耐受 量为１１７８．５８ｇ／ｋｇ；Ｄ一９５ＥｔＯＨ最大耐受量为９９．９４ ｋｇ；Ｓ一 由表１实验结果表明，Ｄ１０１大孔树脂柱分离得到的３个组 分均有毒性成分存在，其中９５％乙醇部位的最大耐受剂量明显 低于水部位及４０％乙醇部位。毒性最大，根据洗脱溶剂极性，该 部位毒性可能与文献报道合欢皮总皂苷有关 ；由表２实验 ４０ＭｅＯＨ最大耐受量为５３１．１５ｇ／ｋｇ；Ｓ一７５ＭｅＯＨ最大给药量为 ２８９８．４０ｇ／ｋｇ；Ｓ一９０ＭｅＯＨ最大给药量为４７５０６．５２ｇ／ｋｇ。 ２０１５年４月第ｌ７卷第２期 Ａｐｒｉｌ ２０１５，Ｖｏ１．１７，Ｎｏ．２ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 湖北中医药大学学报 ・４５・ 厚朴乳膏处方筛选及制备工艺的研究与开发 翁德会 ，毛淑芳 ，程弘夏 ，许腊英 （１．武汉理工大学华夏学院，湖北武汉４３０２２３；２．湖北中医药大学，湖北武汉４３００６４） 摘要：目的厚朴酚性成分具有杀菌、消炎、燥湿、止痒等作用，通过制备乳膏对其提取物进行开发利用。方法 根据厚朴酚、和厚朴酚的特点及乳膏基质的特点，筛选处方组成，并对制备工艺进行研究，通过对乳膏的外观性状、透 皮、稠度和稳定性等指标进行考察，筛选最佳的处方组成，并制备厚朴乳膏。结果 由该比例的组成制备的厚朴乳膏， 重现性好，乳膏色泽较纯正，均匀细腻，稠度适宜，易涂布，稳定性好、透皮吸收等均较好，可以作为最佳配比来制备厚 朴乳膏。结论厚朴乳膏可以作为一种新制剂进行开发利用。 关键词：厚朴酚性提取物；厚朴乳膏；乳膏基质；工艺研究 中图分类号：Ｒ２８３ 文献标识码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８—９８７ｘ．２０１５．０２．１５ １Ｊ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ：Ｍａｇｎｏｌｉａ Ｃｒｅａｍ Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ＷＥＮＧ Ｄｅｈｕｉ ，ＭＡＯ Ｓｈｕｆａｎｇ’ＣＨＥＮＧ Ｈｏｎｇｘｉａ ，ＸＵ Ｌａｙｉｎｇ ，（１．Ｗｕｈａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｈｕａｘｉａ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｗｕｈａｎ ４３０２２３；２．Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｗｕｈａｎ ４３００６４） Ａｂｓｔｒａｃｔｓ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｐｕｅｐｏｓｅ ｈｏｎｏｋｉｏｌ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｈａｓ ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ，ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ，ｅｌｉｍｉｎａｔｉｎｇ ｄａｍｐｎｅｓｓ，ａｎｔｉｐｒｕｒｉｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ， ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｒｅａｍ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｕｓｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｎ ｔｈｅ ｂａｓｉｓ ｏｆ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｃｒｅａｍ ｂａｓｅ ｏｆ ｍａｇｎｏｌｏｌ ａｎｄ ｈｏｎｏｋｉｏｌ，ｔｈｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ，ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ，ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｐｐｅａｒａｎｃｅ，ｔｈｅ 基金项目：国家中医药管理局中医药行业科研专项（２０１００７０１２）。 作者简介：翁德会（１９７４一），女，武汉理工大学副教授，研究方向：中药饮片的有效成分的提取及质量标准化工作。 通讯作者：许腊英（１９５２一），女，湖北中医药大学教授，研究方向：中药饮片标准化研究工作，Ｅ—ｍａｉｌ：ｘｕｌａｙｉｎｇ＠１６３．ｃｏｍ。 结果可见，４０％乙醇部位经ＳＫＰ反相树脂柱分离得到的３个组 分，４０％甲醇部位最大耐受量明显低于７５％甲醇部位及９５％甲 醇部位，毒性最大，４０％乙醇部位的毒性成分可能主要转移至 ４０％甲醇部位。 ｚｉａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ ｉｎ ｍｉｃｅ：Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ５一ＨＴ１ Ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｙｓｔｅｍ ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｅｈａｖｉｏｒ，２００７，８７（１）：４１— ４７． Ｒｏｄｇｅｒｓ Ｒ Ｊ．Ｓｈｅｐｈｅｒｄ Ｊ Ｋ．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｐｒｉｏｒ ｍａｚｅ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ ｏｎ ｂｅ・ ｈａｖｉｏｕｒ ａｎｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｄｉｚｅｐａｍ ｉａｎ ｔｈｅ ｅｌｅｖａｔｅｄ ｐｌｕｓ—ｍａｚｅ ａｎｄ 实验后期将对合欢皮分离纯化的６个化学部位进行抗焦虑 活性的药效实验筛选，由于此６部位最大耐受量或最大给药量 ｌｉｇｈｔ／ｄａｒｋ ｔｅｓｔｓ ｏｆ ａｎｘｉｅｔｙ ｉｎ ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９３，１１３ （２）：２３７—２４２． 均不同，药效实验应根据本次实验结果，来设定给药剂量，以保 证合欢皮抗焦虑药效实验安全、有效地进行。 参考文献： ［１］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典［Ｓ］．一部．北京：化学工业 出版社，２０１０：１３４． 陈小青，马中春，孙运，等．白前和合欢皮提取物小鼠急性经口毒 性研究［Ｊ］．毒理学杂志，２０１２，２６（２）：１５０—１５２． Ｊｕｎｇ ＹＨ，Ｈａ ＲＲ，Ｋｗｏｎ ＳＨ，ｅｔ ａ１．Ａｎｘｉｏｌｙｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｊｕｌｉｂｒｏｓｉｄｅ Ｃ１ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ａｌｂｉｚｚｉａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎｉｎ ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏ—Ｐｓｙ— ｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ＆Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，２０１３，４４（２）：１８４—１９２． ［２］蔚冬红，乔善义，赵毅民．中药合欢皮研究概况［Ｊ］．中国中药杂 志，２００４，２９（７）：６１９－－６２４． 邹坤，赵玉英，郑俊华，等．从合欢皮中分得３个具有细胞毒活性 的三萜皂甙［Ｊ］．北京医科大学学报，１９９７，２８（４）：２９１． 邱丽颖，李倩，许天蟾，等．合欢皮总皂苷所致小鼠肾毒性及其机 ［３］Ｋｉｍ ＷＫ，Ｊｕｎｇ ＪＷ，Ａｈｎ ＮＹ，ｅｔ ａ１．Ａｎｘｉｏｌｙｔｉｅ—ｌｉｋｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ Ａｌｂｉｚｚｉａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ ｂａｒｋ ｉｎ ｔｈｅ ｅｌｅｖａｔｅｄ ｐｌｕｓ—ｍａｚｅ ｉｎ ｒａｔｓ［Ｊ］． Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００４，７５（２３）：２７８７—２７９５． 制的研究［Ｊ］．毒理学杂志，２０１１，２５（６）：４３１—４３４． （稿件修回日期：２０１４－０１－２３编辑：熊斌） ［４］ Ｋｉｍ ＪＨ，Ｋｉｍ ＳＹ，Ｌｅｅ ＳＹ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｄｅｐｒｅｓｓａｎｔ—ｌｉｋｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆＡｌｂｉｚ－