・ｌ４６・ 中国高等医学教育２０１０年第３期 葛根素对失血性休克大鼠纤溶功能 和抗凝血酶活性的影响 潘方平 ，杨娜莎 ，蔡爱月。 （１．永嘉县乌牛镇卫生院；２．永嘉县第三人民医院，浙江温州３２５１００） ［摘要］ 目的：探讨葛根素对失血性休克大鼠纤维蛋白溶解功能（纤溶功能）和抗凝血酶活性的影响及 意义。方法：采用４ＪＤ只成年Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）大鼠，通过快速放血使其处于休克状态，随机分为４组：假手 术组、休克组、林格复苏组（林格组）、葛根素治疗组（葛根素组），每组各１０只。观察血浆组织型纤溶酶原激 活物抗原（ｔ—ＰＡ：他）、纤溶酶原激活物抑制剂一１抗原（ＰＡｌ一１：Ａｇ）、Ｉ）－二聚体含量（Ｄ－Ｄ）、纤维蛋白原含量 （ＦＩＢ）、纤溶酶原活性（ＰＩ ：Ａ）及血浆抗凝血酶活性（ＡＴ：Ａ）的变化。结果：与假手术组比较，休克组和林格 组ＰＩＧ：Ａ、ＦＩＢ、ＡＴ：Ａ显著降低，ｔ—ＰＡ：Ａｇ和Ｄ—Ｄ显著增高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）：葛根素组与林格组比较 ＰＬＧ：Ａ、ＦＩＢ、ＡＴ：Ａ均明显增高，ｔ．ＰＡ：Ａｇ和Ｄ Ｄ明显下降（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）；ＰＡＩ，ｌ：Ａｇ各组间无显著性 差异（Ｆ值为１．９９，Ｐ＞０．０５）。结论：大鼠失血性休克早期纤溶功能亢进，抗凝血酶呈消耗性下降；葛根素 可有效调整大鼠失血性休克后纤溶和抗凝系统失衡的发生 ［关键词］ 葛根素；失血性休克；纤维蛋白溶解功能；抗凝血酶 ［中图分类号］Ｇ６４４ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］ １００２一］７０１（２Ｏ】０）０３—０１４６—０２ 失血性休克是急诊较为常见的休克类型，常导致多器官 林格氏液混合成３倍失血量回输，复苏２ｈ后取血标本。每 功能衰竭而致患者死亡。由于患者失血或血浆渗出致循环 组到预定的时间采集静脉血１．８ｍｌ，加入含有０．２ｍｌ 血量减少，临床上通常给予输液复苏，可获得一定疗效。有 （１０９ｍｍｏｌ／Ｌ）枸橼酸钠的抗凝塑料试管中，颠倒混匀后３０００ｒ／ 报道［Ｉ－２ｊ，输注不同液体复苏效果有别。实验探讨大鼠失血 ａｒｉｎ离心１０ｍｉｎ，分离血浆，立刻置于．４０℃冰箱保存待检。 性休克后采用林格液和中药葛根素加林格液复苏时机体纤 ３．观察指标与检测方法。血浆组织型纤溶酶原激活物 维蛋白溶解功能（纤溶功能）和抗凝血酶的变化，以阐明葛根 抗原（ｔ—ＰＡ：Ａｇ）、纤溶酶原激活物抑制剂．１抗原（ＰＡ１．Ｉ：Ａｇ）含 素对失血性休克纤溶和抗凝血功能的影响。 量均采用酶联免疫法，试剂盒购自上海西唐生物科技有限公 一、材料与方法 司，各项目严格按照说明书操作，在变色龙自动酶标仪上比 １．实验动物与分组。选用温州医学院动物中心的健康、 色测定。在法国ＳＴＡＧＯ—ＳＴＡ自动血凝仪上采用免疫比浊法 成年Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）大鼠，体重２５０－３００ｇ，雌雄不限。４０ 测定血浆Ｄ二聚体（ｏ－ｏ）含量，发色底物法测定纤溶酶原活 只大鼠随机分为假手术组、休克３ｈ组（休克组）、林格氏液复 性（ＰＩＧ：Ａ）和抗凝血酶活性（ＡＴ：Ａ），凝固法测定纤维蛋白原 苏组（林格组）和林格氏液加葛根素治疗组（葛根素组），每组 （ＦＩＢ）含量，所用试剂均由ＳＴＡＧＯ公司提供，严格按说明书操 １Ｏ只。实验前禁食过夜，但自由饮水。 作。 ２．失血性休克模型。大鼠用２０％（４ｍｇ／ｋｇ）乌拉坦经腹 ４．统计学方法。数据以均值±标准差（ ± ）表示，采用 腔内麻醉后分离左侧颈总动脉和右侧颈外静脉。用２２—１８Ｇ ＳｔｘＳＳ １１．０统计软件包处理，多组间相同指标的比较采用单 动脉穿刺针行动脉插管，整个管道系统预充０．９％生理盐水 因素方差分析，如差异有统计学意义则进一步行组内两两间 液。经三通及压力传感器与多功能监护仪相连。右侧颈外 比较，方差齐同者采用ＳｔｕｄｅＪｌｔ Ｎｅｗｍａｎ Ｋｅｕｌｓ法，方差不齐同 静脉穿刺、插管，用于采血和输液或回输所放的血液。假手 者采用Ｔａｍｂａｎｅ’ｓ法。 术组：仅行颈动静脉插管，未予以放血观察３ｈ后，取血标本； 二、结果 其余三组均按Ｌａｍｓｏｎ法快速放血使平均动脉压（ＭＡＰ）降至 大鼠失血性休克后及用林格氏液和葛根素复苏后ＰＬＧ： ４０ｍｍＨｇ，记为休克开始，并密切观察ＭＡＰ的变化，通过回输 Ａ、ｔ—ＰＡ：Ａｇ、ＰＡｌ一１：Ａｇ、ＨＢ、Ｄ．Ｄ及ＡＴ：Ａ的结果及比较见附 所放的血液或输液使ＭＡＰ维持于４０ｍｍＨｇ左右水平直到预 表。 定的时间。然后，休克组：不给予任何处理，３ｈ后取血标本； 附表显示：与假手术组比较，休克组和林格组ＰＩＧ：Ａ、 林格组：休克稳定１ｈ后通过回输失血量三倍的乳酸林格氏 ｂｉｂ、ＡＴ：Ａ显著降低，ｔ．ＰＡ：Ａｇ和Ｄ．Ｄ显著增高（Ｐ＜０．０１或Ｐ 液，复苏２ｈ后取血标本；葛根素组：休克稳定ｌｈ后将３０ｍｇ／ ＜０．０５）；葛根素组与林格组比较ＰＩＧ：Ａ、ＦＩＢ、ＡＴ：Ａ均明显增 ｋｇ葛根素（北京协和药厂，批号２００５０１１３，每支１００ｒａｇ）与乳酸 高，ｔ—ＰＡ：矩和Ｄ—Ｄ明显下降（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）；ＰＡ１．１： 中国高等医学教育２０１０年第３期 附表各实验组大鼠纤溶功能指标和抗凝血酶活性的结果及比较（ ±ｓ） 注：与假手术组比较：★Ｐ＜０．０１，★－ｋＰ＜０．０５；与休克组比较▲Ｐ＜０．０１；与林格组比较☆Ｐ＜０．０１，☆☆Ｐ＜０．０５ 舷各组间无显著性差异（Ｆ值为１．９９，Ｐ＞０．０５）。 管、改善微循环、抗自由基损伤的作用【 ，大量的动物以及临 二、讨论 床实验证实，葛根素对许多脏器的缺血、缺氧有保护作用，抗 失血性休克为临床常见的危重症，是重要生命器官得不 缺血再灌注损伤作用等ｌ７ Ｊ。本次实验对失血性休克大鼠给 到足够的血流灌注或组织细胞对氧气及营养物质利用障碍 予输注含中药葛根素的林格液复苏，结果表明，葛根素组与 的一种复杂的全身ｌ生病理过程。本实验结果显示：与假手术 林格组比较，ＰＬＧ：Ａ、ＩＦＢ、ＡＴ：Ａ均明显增高，ｔ－ＰＡ：Ａｇ和Ｄ—Ｄ 组比较，失血性休克组ＰＬＧ：Ａ、ＦＩＢ、ＡＴ：Ａ显著降低，ｔ—ＰＡ：Ａｇ 明显下降（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），说明休克期的高凝、纤溶亢 和Ｄ—Ｄ显著增高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），表明大鼠失血性休 进状态得到改善。其作用机理可能是葛根素通过抗氧自由 克早期机体处于高凝和纤溶活性亢进状态。这是由于休克 基等作用，保护内皮功能，从而改善失血再灌注所致高凝、纤 后，导致机体缺血、缺氧及氧自由基的释放致使血管内皮细 溶亢进状态。 胞损伤，ｔ－ＰＡ由内皮细胞释放入血，使纤溶酶原转变成纤溶 综上所述，大鼠失血性休克过程中，由于缺血、缺氧及氧 酶，激活纤溶系统；而暴露血管内皮下组分激活凝血因子和 自由基的释放致使血管内皮细胞损伤，使机体处于高凝状态 血小板，启动内源性凝血途径，同时组织因子的释放启动外 和纤溶功能亢进。单纯性林格液复苏很难改善凝血及纤溶 源性凝血途径，生成大量凝血酶，ＡＴ为了灭活凝血酶与其形 功能，而葛根素的加注能使凝血及纤溶功能得到改善。因 成无括性的凝血酶一抗凝血酶复合物，而出现消耗性下降， 此，在失血性休克救治过程中要选择适合的复苏方式，同时 大量的凝血酶又使纤维蛋白原转化为纤维蛋白ｌ３ ，导致纤维 严密监测凝血参数变化，注意纤溶功能和抗凝血酶的变化， 蛋白原大量消耗。Ｄ．Ｄ是交联纤维蛋白降解特征性产物，含 防止致命性弥散性血管内凝血的发生。 量增加表明大鼠休克过程中伴有继发性纤溶亢进。 失血性休克救治的首要问题是尽早恢复有效血容量，维 ［参考文献］ 持基本组织灌流，临床上及时予以容量复苏，常用乳酸林格 ［１］梅冰，康舟军，霍正禄．创伤性休克后血浆黏附分子的变化及不 氏液等晶体液复苏。本次实验对失血性休克大鼠给予输注 同复苏液的影响［Ｊ］．中华实验外科杂志，２００４，２１：１５４４—１５４６． 失血量三倍的乳酸林格氏液，尽管血容量得到了补充，但分 『２１Ｃｈｅｎ ＸＸ，Ｙｅ ＧＳ，Ｓｈｕａｉ ｘｌ，ｅｔ ａ１．Ｈｅ￣ｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｌｉｔｍｔｅｄ ｌｆｕｉｄ ｒｅｓｕｓ— ｃｉｔａｔｉｏｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ｏｎ ｓｅｖｅｒｅ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｔｒａｕｎｍ ａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄ ｗｉｔｈ ｈｅｍｏ￣ｈａｇ— 析纤溶功能指标和抗凝酶的变化发现，与假手术组比较，林 ｉｃ ｔｒａｕｍａｔｉｃ ｓｈｏｃｋ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ Ｊ Ｇｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ，２００４，２４：１７８—１８０． 格组ＰＬＧ：Ａ、ＦＩＢ、ＡＴ：Ａ也显著降低，ｔ—ＰＡ：Ａｇ和Ｄ—Ｄ显著增 ［３］Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ ＪＨ．Ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ：ａ ｋｅｙ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｉｎ ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ ａｎｄ ｎｏｎｈｅｍｏ・ 高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），休克期的纤溶和抗凝功能没有得 ｓｔａｔｉｃ ｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｈｅｍａｔｏｌ，２００４；７９：１０３—１０８． 到很好的改善，仍处在高凝和纤溶亢进状态。这是由于失血 ［４］马晓鹂，邵义明，邓烈华，等．乳酸钠林格液对血浆凝血因子Ｉ和 性休克再灌注时可通过氧自由基等物质损伤血管内皮细胞， 抗凝血酶一Ⅲ的影响［Ｊ］医药导报，２００５，７：５９９．６００． 同时大量的晶体液复苏后，血浆胶体成分如白蛋白等被稀 ［５］马朋林，苏瑾文．失血性休克复苏及监测指标研究进展（Ｊ］．解放 军医学杂志，２００５，７：６６８—６７０． 释，胶体渗透压下降，血管内水向组织间渗透，导致组织水 ［６］胡静，徐德生．葛根素药理和临床研究进展 Ｊ］．世界临床药理， 肿，更加剧组织细胞进一步损伤ｌ １，而血液稀释本身就可诱 ２００６．４：２１６—２２０． 导凝血酶形成，凝血酶增多既可促进ＦＩＢ转化，又可与ＡＴ形 ［７］夏华玲．葛根素的药理作用研究进展［Ｊ］．时珍国医国药，２００６，３： 成复合物，最后导致ＦＩＢ和ＡＴ消耗ｌ５ Ｊ。因此，单纯晶体液复 ４３４．４３５． 苏，不能改善休克所致的血液高凝、纤溶亢进状态，反而造成 凝血、抗凝与纤溶之间的平衡紊乱，易引起血栓形成的危险， ［收稿Ｅｔ期］２００９—１２ 甚至诱发ＤＩＣ。 ［作者简介］潘方平，男，本科，主管检验师，研究方向：血液检 葛根素是中药葛根中提取的有效成份之一，具有扩张血 验。