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系(部)： 基础部

课程名称 课程类别 （√ ） 授课专业 生物化学实验 课程代码 学 分 总学时： 学时 讲 课： 学时 上 机： 学时 实 验： 30 学时 理论课（ ） 公共课（ ） 必 修 课（ √ ） 实验课（ √ ） 专业课（ ） 院级任选课（ ） 农学、园艺、水产、 动科、食品 李天俊 王英超、任健 授课班级 动科、食品、动医、生物、农学、环境、水产、海洋、园艺、观赏园艺、植保 高级实验师 助理实验师 任课教师 职称 本实验课配合理论教学，通过实验从实践中进一步学习，掌握和运用学过的基本理论；运用生物化学理论分析实验过程中的各种现象和问题，培养、训练学生的分析和解决问题教学目的的能力。 和要求 学生必须完成的基本要求：准备实验，拟定实验方案；组织实验；写出预习报告，拟定记录表格；测取实验数据；整理实验数据；写出实验报告。 通过生物化学实验课的学习，使学生掌握最基本的生物化学分析技术，包括分光光度技术、电泳技术、离心技术、层析技术， 不仅掌握实验原理，而且掌握操作方法；对理论知教学重点、识（蛋白质、核酸、酶、维生素）加以验证。增强学生的动手能力，提高学生分析问题、难点 解决问题的能力。 刘祥云，张云贵，李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 教材和参考书 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年

教案格式③

天津农学院教案(课时备课)

第 1 次课 3 学

时 课目、课题 蛋白质的两性反应及等电点的测定 教学目的 和要求 重点 难点 了解蛋白质的两性解离性质并学习测定蛋白质等电点的一种方法 蛋白质的两性反应，等电点的测定 教学进程(含课堂教学内容、教学方法、 辅助手段、师生互动、时间分配、板书设计) 主要内容：蛋白质的两性反应及蛋白质等电点的测定 采用课堂讲授方式进行，中间采用随堂提问的形式对学生进行提问，检验预习效果 蛋白质的两性反应，然后蛋白质等电点的测定 作业布置 完成实验报告，并完成布置的思考题 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 主要 参考资料 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 这个实验个为验证性实验。考察学生对概念的理解。 课后自我总结分析

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第 2 次课 3 学时 课目、课题 考玛斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量 教学目的 和要求 重点 难点 学习和掌握考玛斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理和方法 标准曲线的制作，样品蛋白质含量的测定。 教学进程(含课堂教学内容、教学方法、 辅助手段、师生互动、时间分配、板书设计) 主要内容：牛血清白蛋白标准曲线的制作，样品中蛋白质的提取，测定，结果与计算。 采用课堂讲授方式进行，中间采用随堂提问的形式对学生进行提问，检验预习效果 学会使用分光光度计。 作业布置 完成实验报告，并完成布置的思考题 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 主要 参考资料 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 这个实验一个为设计性实验。考马斯亮蓝实验讲课过程中，应重点强调比色时间问题，因课后自我为时间长了，影响实验结果。 总结分析

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第3 次课 3 学时 课目、课题 血清球蛋白的分离 ——分子筛凝胶层析法 教学目的 和要求 学习和掌握分子凝胶层析法的原理和技术（溶胀，装柱，加样和洗脱）了解葡聚糖凝胶的选用原则 重点 难点 凝胶过滤层析的原理及操作 教学进程(含课堂教学内容、教学方法、 辅助手段、师生互动、时间分配、板书设计) 主要内容：球蛋白的盐析、装柱、上样、洗脱、鉴定。 采用课堂讲授结合幻灯片演示使学生对凝胶层析有一个形象的了解 采用随堂提问的形式对学生进行提问，检验预习效果。 首先进行装柱，然后平衡20分钟，用这段时间进行试管的洗涤，最后上样、洗脱、鉴定 作业布置 完成实验报告，并完成布置的思考题 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 主要 参考资料 课后自我本实验为验证性实验，关键步骤是灌胶这一步，如果这步做不好，柱子中的凝胶无法使用。总结分析 那么后面的实验步骤就无法进行。应重点强调凝胶要持续加，胶不能出现和断层

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第 4次 课3学

时 课目、课题 教学目的 和要求 醋酸纤维薄膜电泳法分离动物血清蛋白质 掌握醋酸纤维薄膜电泳的原理，操作及测定动物蛋白质的相对百分含量技术 重点 难点 醋酸纤维薄膜点样、电泳、染色、漂洗、透明 教学进程(含课堂教学内主要内容：醋酸纤维薄膜的润湿和选择、制作电桥、点样、染色、漂洗、透明。 容、教学采用课堂讲授方式进行，中间采用随堂提问的形式对学生进行提问，检验预习效果 方法、 辅首先练习点样等学生掌握基本的点样技术后再正式发薄膜进行点样，电泳之后再接着讲助手段、师生互授染色、漂洗和透明 动、时间分配、板书设计) 作业布置 完成实验报告，并完成布置的思考题 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 主要 参考资料 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 本实验的关键步骤是点样，在练习点样时应指导学生点成适当的宽度，然后再发给他们醋 酸纤维薄膜点样，这样以后的实验就会成功。 课后自我总结分析

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第 5 次课 6 学时 课目、课题 血清乳酸脱氢酶同工酶的分离与测定 （聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法） 掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术，包教学目的 和要求 括制胶、灌胶、加样、电泳、剥胶、染色及脱色等。学会用盘状凝胶电泳分离同工酶。 重点 难点 电泳原理及实验操作技术 教学进程(含课堂教学内主要内容：分离胶和浓缩胶的制备、安装、上样、电泳、剥胶、染色、固定 容、教学采用课堂讲授方式进行，中间采用随堂提问的形式对学生进行提问，检验预习效果 方法、 辅利用课间时间灌胶，等胶聚合好后上课时直接上样，利用电泳时间讲授实验原理和剩余助手段、师生互的实验内容。 动、时间分配、板书设计) 作业布置 完成实验报告和布置的思考题 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 主要 参考资料 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 课后自我本实验为综合性实验，时间较长，本实验的关键步骤是灌胶，因为凝胶聚合的时间比较，总结分析 可以先让学生利用课余时间灌制，正式上课时就可以直接电泳。另外实验的难点就是实验原理，可以结合生动的实际例子，使学生易于理解

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第6 次课 3 学时 课目、课题 教学目的 和要求 动物肝脏DNA的提取 了解DNA和RNA 的不同溶解性质。学习用盐溶液法从动物组织中提取DNA的原理和操作技术。 DNA的提取、核糖核蛋白的去除、DNA与蛋白质的分离、蛋白质的变性、充分振荡三 角瓶、沉淀DNA 重点 难点 教学进程(含课堂主要内容：DNA的提取，核糖核蛋白的去除，DNA与蛋白质的分离，蛋白质的变性，

教学内容、教学DNA的析出 方法、 辅采用课堂讲授方式进行，中间采用随堂提问的形式对学生进行提问，检验预习效果 助手段、首先进行内脏研磨释放出DNA，然后离心2次，去掉RNP后，将上清液转入离心杯，师生互进行后面的蛋白质的变性和沉淀DNA的操作。 动、时间 分配、板书设计) 作业布置 完成实验报告，并完成布置的思考题 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 本实验的关键是三角瓶的震荡，这样可以使DNA与蛋白质充分分离。另外为了将DNA这种微小的物质形象化，可以将日常生活中与DNA有关的实例介绍给学生，提高他们的实 验兴趣 主要 参考资料 课后自我总结分析

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第 7 次课 3 学时 课目、课题 紫外吸收法测定核酸含量 学习紫外分光光度法测定核酸含量的原理和操作方法，熟悉紫外分光光度计的基本原教学目的 和要求 理和使用方法 重点 难点 学会DNA紫外吸收的原理及测定方法，学会核酸蛋白分析仪的使用。 教学进程(含课堂教学内容、教学方法、 辅助手段、师生互动、时间分配、板书设计) 用电子天平称量1mg，用水溶解，260nm测定光吸收值，进行计算。 作业布置 完成实验报告，并完成布置的思考题 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 主要 参考资料 本实验是将学生自己提取的DNA 进行测定，在上次提取的基础上完成。 课后自我总结分析

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第8 次课 3 学时 课目、课题 应用纸层析法鉴定酶促转氨基作用 转氨基作用是动植物界普遍存在的一种生化反应，研究动植物体的转氨基作用，可以教学目的 和要求 了解动植物体不同发育阶段代谢动态的一个侧面，从而研究控制其代谢途径 重点 难点 学会纸层析的原理及操作方法。 教学进程(含课堂教学内容、教学方法、 辅助手段、师生互动、时间分配、板书设计) 主要内容：纸层析法实验首先进行肌肉糜的制备、酶促反应、点样、层析、显色 紫外吸收法测定核酸含量实验：取上次实验的DNA粗制品用10倍体积的蒸馏水溶解，然后于280nm处测定其吸光度值。 采用课堂讲授方式进行，中间采用随堂提问的形式对学生进行提问，检验预习效果 时间分配：首先进行纸层析法实验，即先进行酶促反应，点样层析后，显色。 作业布置 完成实验报告，并完成布置的思考题 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 主要 参考资料 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 课后自我本实验的关键步骤是点样，样品点4个点，而且每个样品还不能点重复，所以在上课中对 总结分析 学生要重点强调这个问题。

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第 9 次 课3学时

课目、课题 教学目的 和要求 重点 难点 维生素C含量的测定 学习定量测定维生素C的原理和方法，掌握微量滴定技术。 抗坏血酸的提取，滴定终点的确定 教学进程(含课堂教学内主要内容：样品中抗坏血酸的提取、维生素C标准溶液的标定，样品滴定 容、教学方法、 辅采用课堂讲授方式进行，中间采用随堂提问的形式对学生进行提问，检验预习效果 助手段、先进行样品的研磨，然后定容至50mL，过滤，利用过滤的时间进行标准维生素C的滴师生互定，最后进行样品的滴定。学会微量滴定管的使用。 动、时间分配、板书设计) 作业布置 完成实验报告，并完成布置的思考题 主要 参考资料 刘祥云，张云贵李天俊主编，《生物化学实验指导》，2005年 李建武等主编，《生物化学实验原理和方法》，1994年 赵永芳主编，《生物化学技术原理及应用》，2001年 讲授时添加些有关于维生素C在日常生活中应用的实例（比如说缺乏维生素C的症课后自我总结分析 状），这样学生在上课时会对维生素C的作用理解得更深。