生物技术制药总结

1.什么是生物技术？生物技术包括的主要内容有哪些？

生物技术又叫生物工程，以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，生产出所需产品或达到某种目的的技术。生物技术包括的

主要内容有基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程等

2.什么是生物技术药物？按照它们的生化特性可以分为哪几类？

生物技术药物采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物，主要是重组蛋

1按用途分类：治疗药物、预防药物、作为诊断药物(免疫诊断试剂、白或核酸类药物 分类：○

酶诊断试剂、器官功能诊断药物、放射性核素诊断药物、诊断用单克隆抗体(McAb)、诊断用

2按作用类型分类：细胞因子类药物、激素类药物、酶与辅酶类药物、疫苗、单DNA芯片 ○

3按生化特性分类：克隆抗体药物、反义核酸药物、RNA干扰(RNAi)药物、基因治疗药物 ○

多肽类药物、蛋白质类药物、核酸类药物、聚乙二醇(PEG)化多肽或蛋白质药物

3.生产用动物细胞的种类有哪些？ 原代细胞，传代细胞系，转化细胞系，工程细胞系 4.与微生物细胞、植物细胞相比，动物细胞的体外培养有何特点？

1比微生物细胞大得多，无细胞壁，抗机械强度低，对剪切力敏感，适合环境能力差 ○2倍○

3对培养基要求高，易受微生增时间长，生长缓慢，正常二倍体细胞的生长寿命是有限的 ○

4生长大多需贴附于基质，相互粘连以集群形式存在，并物污染，培养时常需添加抗生素 ○

5多半将产物分泌心在细胞外，6对蛋白质的合成条件和有接触抑制现象 ○便于收集和纯化 ○

修饰功能与细菌不同 。动物细胞可对蛋白质进行完善的翻译后修饰，特别是糖基化，与天然产物更一致，更适于临床应用

5.单克隆抗体的制备过程大体上可以分为哪几步？ 可分抗原的制备、动物的免疫、B细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞、筛选杂交瘤细胞、筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞、杂交瘤细胞的克隆化、体外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆、单抗的纯化及鉴定 6.单克隆抗体的制备的原理？

单克隆抗体的制备原理是基于动物细胞融合技术得以实现的，即骨髓瘤细胞与B细胞的融合。骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；而抗原免疫的B细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖，将免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。 7.酶分离纯化的一般程序。

酶分离纯化的一般程序主要包括原材料的选择和预处理、酶的分离、酶的精致和酶的浓缩干燥及结晶等步骤。

8.与游离酶相比，固定化酶有何优缺点？

游离酶的缺点：酶是蛋白质，稳定性差(热、酸碱、有机溶剂对其有影响)。酶不能回收，无法重复使用。产物中混杂酶蛋白，分离纯化困难。 固定化酶：优点：(1)可提高酶的稳定性。(2)酶能回收，易与产物分离，可反复使用。缺点：(1)存在扩散。适于催化小分子物质。(2)酶活性下降。固定化细胞：优越性：(1)降低成本，省去酶的分离纯化工作：(2)既可作为单一酶，也可作为复合酶系完成部分代谢过程。局限性：(1)细胞内多种酶的存在，会形成不需要的副产物。(2)细胞膜、细胞壁和载体都存在着扩散作用。 9.微生物转化中药的的基本途径有哪些？

1微生物将中药中的有效成分经代谢形成新的化合物 ○2微生物将原转化途径归纳下来有：○

3微生物产生的某些次级代谢产物与中药中的本没有活性的化合物转化成有活性的化合物 ○

4微生物在中药的特殊环境中有可能改变自身的代谢途某些物质发生反应形成新的化合物 ○

5微生物的分解作用有可能将中药中径，从而形成新的活性物质或者改变活性成分的比例 ○

的有毒物质降解，从而降解药物的毒副作用。利用微生物转化来炮制中药，有可能较大幅度的改变药性，提高药效，降低毒副作用，扩大适应症。 10.甾体药物的微生物转化反应有何特点。 不同于常规的发酵过程，甾体药物大都不溶于水，且终反应产物对改造位点的专一性要求高。11.什么是蛋白质的化学修饰？它有何意义？ 从广义上讲，凡是通过基团引入或去除导致蛋白质一级结构发生改变的过程，统称为蛋白质

1增大分子量，避免肾小球滤过 ○2免疫原性降低或消的化学修饰。意义：循环半衰期延长○

3物理、4增加药物溶解度，失，毒副作用减少 ○化学和生物稳定性增强 ○延长体内水解时间

12,。蛋白质药物的PEG化修饰的修饰策略。

利用活化的修饰剂对蛋白质进行修饰是活化的修饰剂与蛋白质分子功能集团的反应，这些功能集团主要是蛋白质的氨基、巯基、羧基等，针对不同的功能集团和修饰所需达到的目的，

1随机修饰：氨基(游离赖氨酸残基-NH2) ○2定点修饰：针对特往往采取不同的修饰策略。○

定基团或专一位点进行修饰，有利于保持蛋白质药物活性，质量易控。氨基修饰(N-末端-NH2)；巯基修饰(-SH高亲和性)；羧基修饰(-COOH)

分析题

1.基因工程制药中，三大主要基因工程表达体系有何不同？请完善如下表格内容： 2.基因工程药物与化学药物相比，具有什么特点？

基因工程特点：基因重组，通过外源载体将外源基因导入受体细胞实现目的蛋白的表达。 化学药物特点：通过元素之间的组合成一种化合物质，对人类有作用的一类化合物。 3.疫苗的概念、组成及其作用原理。

概念：主要是指将病原微生物（细菌、病毒、真菌、立克次氏体、支原体、衣原体等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的免疫制剂 组成：具有免疫保护性的抗原如蛋白质、多肽、多糖或核酸等与免疫佐剂混合制备而成。 作用原理：当机体通过注射或口服等途径接种疫苗后，疫苗中的抗原分子就会发挥免疫原性作用，刺激机体免疫系统产生高效价特异性的免疫保护物质，如特异性抗体、免疫细胞及细胞因子，当机体再次接触到相同病原菌抗原时，机体的免疫系统便会依循其免疫记忆，迅速制造出更多的保护物质来阻断病原菌的入侵，从而使机体获得针对病原体特异性的免疫力，使其免受侵害而得到保护

培养特性

4.试设计皮内注射用卡介苗的主要制备流程。

毒力试验

卡介菌种培养 种子批的建立 种子批的传代 种子批的检定 无有毒分枝 生产用种子与培养基 杆菌试验

免疫力试验

种子批的保存 原液制造 接种与培养 原液检定 半成品配置和鉴定

收获与合并 成品

5.请设计青霉素发酵生产的一般流程 菌丝体 综合利用

冷冻干燥孢子 琼脂斜面 米孢子 种子罐 发酵罐 过滤 青霉素回收 消沫剂

补料

碳 氮 前 源 源 体 6.试分析发酵过程的影响因素及控制。

1菌体浓发酵过程的影响及控制：菌体浓度、营养物质、温度、pH值、溶氧、泡沫、染菌 ○

度—通过控制培养液中营养基质的浓度(基础培养基各成分要有适当配比；通过中间补料调

2营养物质：碳源、氮源—用含有两种碳/氮源的培养基进行控制；磷酸盐整培养基成分) ○

3温度—在发酵不同阶段，采用不—对初级代谢产物及次级代谢产物的控制；补料的控制 ○

4pH值—调节培养基组分，增加缓冲体系；补料；同温度；针对不同条件，采用不同温度 ○

5溶氧—调节搅拌转速和通气率；控制菌体浓度，使细菌比生长速率略高于临界补加酸碱 ○

6CO2—控制通气量；7泡沫—机械消沫；7值 ○控制搅拌速度；控制补料工艺 ○消泡剂消沫 ○染菌—设备无渗漏；管道系统无渗漏；空气净化系统正常