ELISA法检测粪便中轮状病毒抗原及其临床意义

浙江实用医学２０Ｏ６年ｌＯ月第ｌ１卷第５期　３４５　ＥＬＩＳＡ法检测粪便中轮状病毒抗原及其临床意义　郑海斌陈友土胡含　（舟山市普陀区人民医院，浙江舟山３１６１００）　摘要　目的探讨粪便中轮状病毒对临床诊断的价值。方法　以２６３例秋冬腹泻患儿为研究对象，应用轮　状病毒单克隆抗体检测病毒抗原的方法，测定其大便中轮状病毒抗原。结果检出轮状病毒抗原阳性患儿１６３例，　阳性率６２％。将６个月　２岁婴幼儿组分别与＜６个月婴儿组、＞２～６岁幼儿组作比较均（Ｐ＜Ｏ．０５），表明６个月　～２岁婴幼儿为轮状病素感染的高发期。结论粪便中轮状病毒抗原检测是诊断轮状病毒肠炎较敏感的方法，对　临床诊断该病可提供有价值的依据。　关键词　轮状病毒婴幼儿腹泻粪便病毒抗原检测　轮状病毒（Ｒｏｔｒｖｉｍｓ，ＲＶ）是婴幼儿秋冬腹泻的　主要病原，常导致水电解质酸碱平衡紊乱，严重危　２结果　害患儿心身健康甚至危及生命。为了解腹泻患儿　对２６３例秋冬腹泻患儿的粪便标本进行ＲＶ抗　中轮状病毒感染情况，并探讨轮状病毒抗原检测的　原检测，阳性１６３例（阳性率６２％），其中男８５例（占　临床应用价值，本院于２００４年ｌ０～ｌ２月，采用轮状　阳性例数的５２．１％）；女７８例（占４７．９％）。年龄＜　病毒单克隆抗体检测病毒抗原的方法，对临床诊断　６个月的２０例占阳性例数的ｌ２．３％，６个月～２岁　为秋冬腹泻患儿的２６３例粪便标本进行轮状病毒抗　１３３例占阳性例数的８１．６％，＞２～６岁ｌ０例占阳性　原检测，结合临床数据分析如下。　例数的６．１％。各年龄组轮状病毒抗原检出结果，　见表１。　１资料与方法　表１不同年龄组患儿轮状病毒抗原检测结果　１．１一般资料本院门诊就诊及住院急性腹泻患　儿２６３例，其中男１６０例，女２０３例，门诊１５６例，住　院１０７例。年龄在１个月～６岁之间，其中年龄＜６　个月４ｏ例，６个月～２岁１９９例，＞２～６岁２４例。　所有患儿血液分析ＷＢＣ总数正常，淋巴细胞比例　与６个月一２岁组比较’Ｐ＜Ｏ．０５　增高；部分患儿有呕吐、脱水、发热等临床症状。病　６个月～２岁婴幼儿组与＜６个月婴幼儿组、２　程＜３天５０例，３～７天１７０例，７天以上４３例。　～６岁组作比较均有显著差异（．尸＜０．０５），＜６个月与　１．２检测方法试剂盒由依利康生物技术有限公　＞２～６岁组比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５），６个月～２　司提供，采用ＥＬＩＳＡ一步法原理，由Ａ群轮状病毒　岁婴幼儿为轮状病毒感染高发期。　克隆抗成的新一代诊断试剂。结果判断以目　测或加一滴终止液，６ｏ分钟内于４５０ｒｉｍ读取吸光值　３讨论　（ＯＤ值）以空白孔调零。目测：待测样品孔显蓝色，　近年来，由病毒引起的婴幼儿腹泻越来越多，　可判断为阳性；反之为阴性；据显色深浅判　在我国由轮状病毒引起的婴幼儿急性腹泻常常在　（＋＋＋＋）、（＋＋＋）、（＋＋）、（一）（参照盒盖上四色　秋冬造成大范围的流行，每年ｌ０～ｌ２月是发病高峰　彩图）。用ＯＤ值判断：样本ＯＤ值≥０．１５为阳性反　期，主要侵犯２岁以下的婴幼儿，严重影响了儿童　之为阴性。用一次性清洁干净的塑料盒收集新鲜　的健康发育。本组腹泻婴幼儿因ＲＶ病原体感染而　粪便标本立即送检，随到随做，同时对粪便标本做　引起腹泻者占６２％，与国内报道相近，表明轮状病　常规检验。　毒是婴幼儿秋冬腹泻的主要病原体。　１．３统计学处理统计数据用Ｙ　检验。　本组结果显示腹泻患儿中轮状（下转第３５１页）　维普资讯 http://www.cqvip.com

浙江实用医学２ＯＯ６年１Ｏ月第１１卷第５期　３５１　近，手术显微镜下可见断端呈白色或粉红色“喇叭　口”样，稍内陷；（２）本组病例均采用筛前及眶下神　经阻滞麻醉。局部浸润麻醉可致组织肿胀，可造成　断端“退缩”假象，增加寻找断端的难度；（３）断端距　下泪小点大于６．０ｍｍ时，断端位置深，暴露困难，可　寻找断端并吻合已被认为是治疗泪小管断裂的标　准方法　川。本组病例应用泪小管内插入支撑物　后，直接缝合泪小管周围的环形肌肉３针，严密缝　合泪小管周围组织，这样既可避免过度损伤泪小　管，又可保证泪小管较好愈合。　参考文献　１　ＤＯｒｔｚｂａｃｈ　Ｒ　Ｋ，Ａｎ　ｓＩ　Ｒ　Ａ．Ｓｉ！ｉｅｏｎｅ　ｉｎｔｕｂａｔｉｎ　ｆｏｏｒ　ｌｅｃｅｒａｔｅｄ　ｌａｃｒｉｍａｌ　ｃａｎａｌｉｃｕｌｉ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ　Ｓｕｒｇ，１９９９，１６：６３９　在鼻侧端皮下缝线牵引，使创面呈“漏斗”状，便于　寻找断端。对于眼睑创口不整齐，局部肿胀较重，　采用各种方法仍未找到泪小管鼻侧断端的病例，作　者采用弯针法＿５　Ｊ，也取得了较好的效果。本组病例　均采用硬膜外麻醉导管插入泪小管内作支撑物，为　了提高泪小管断裂吻合的成功率，吻合过程中泪小　管两侧断端务必对位准确，避免泪小管全层缝合，　因为缝合线对泪小管黏膜的刺激是引起术后泪小　管再狭窄和阻塞的重要原因，缝合时尽可能使泪小　管断裂口外翻，防止吻合口狭窄。内眦韧带或皮下　组织预置减张线完成后，先结扎减张缝线，再结扎　泪小管吻合缝线，以避免细弱的　目小管吻合线断　裂。　２　Ｒｅｉｌｆｅｒ　ＤＭ．Ｍａｎａ￣ｅｌｎｅｒｔｔ　ｏｆ　ｃａｎａｌｉｃｕｌａｒｌａｃｅｒａｔｉｏｎ．ＳｕｒｖＯｐｈｔｈｍｏｌ，１９９９，　３６：１１３　３王日新，于水泳，周长虹．双泪道环路硅胶插管泪小管吻合术．中　国实用眼科杂志，２００４，２２（７）：５２２　４上海医科大学眼耳鼻咽喉教研组编著．眼科学．北京：人民卫生　出版社。１９９７．２９　５陈晓隆，高殿文．４７例外伤性泪小管断裂的手术治疗．中华眼科　杂志，２０００。３６（４）：３１０　６李坚恩，武传红，吴永群．双导管法在泪小断裂吻合术中的应用．　眼外伤职业病杂志，２ＯＯ２，２４（２）：３４３　７张平．环行探针在泪小管断裂吻合术中的应用．眼外伤职业病杂　志，２０Ｏ２。２４（２）：３４５　泪小管断裂吻合的方法很多，如弯针法、环行　导管法、双导管法、改良泪道探针法，直接显微镜下　（上接第３４５页）病毒检出率以６个月一２岁组最高　（占６６．８％），表明轮状病毒引起的婴幼儿腹泻多发　生在６个月　２岁的婴幼儿，６个月以下的婴幼儿和　经常洗晒婴幼儿的衣物等，以减少ＲＶ感染率；标本　的采集可直接影响检验结果，轮状病毒肠炎潜伏期　１　３天，病程一般５　７天，呈自限性，病毒的排出　高峰时间是发病３—５天，故在发病后１～３天内采　样，病毒的检出率较高。　作者采用轮状病毒抗原诊断试剂盒对秋冬季　腹泻患儿进行病原学检查，这对于指导合理用药具　２岁以上的幼儿发病较少。＜６个月的婴幼儿体内　有从母体中取得的特异性ＩｇＣ抗体及乳汁中分泌的　ＬｇＡ抗体而获得部分保护作用，故＜６个月的婴儿　ＲＶ阳性率较低，而６个月一２岁正是很多婴幼儿喂　养方式转变的时期，开始减少母乳喂养或完全停　止，一旦来自母体抗体水平下降后，自身免疫力下　降，当与ＲＶ接触时易感染，于是形成轮状病毒的高　发期。２岁以上感染率低可能是因为接触过抗原使　体内产生了一定量的相应抗体，对一部分再次接触　者起到了一定的保护作用。　据有关资料报道，全世界每年因腹泻死亡的婴　儿８００～１５００万人，其中４０％　５０％由轮状病毒引　起，由于ＲＶ传播的主要途径为粪一口传播，患儿常　伴有呕吐或急性腹泻；因此为降低轮状病毒腹泻的　发病率，对于ＲＶ感染的患儿应控制传染原切断传　染途径预防医院病房内交叉感染。每日用０．５％　（ｖ／ｖ）过氧乙酸对患儿的排泄物，生活区等接触过的　地方采取消毒，对患儿也应隔离，防止交叉感染；同　时应注意患儿的个人卫生，保持病房内空气流通和　有十分重要意义。本试剂盒具有快速、特异、敏感、　方法简单、结果准确等优点。适用于各级医疗单位　诊断，以便及时发现病原及时消毒预防，积极治疗，　避免病情加重，防止轮状病毒的流行。　参考文献　１刘明娟，肖桂芝，于晓东，等．乳山市４１４例婴幼儿腹泻的病原学　分析．临床检验杂志，１９９４，１２（２）：８６　２郁凯明，徐绮，黄海，等．抗轮状病毒牛初乳抑制肠道中轮状病毒　的机制探讨．Ｉ｝缶床儿科杂志，１９８６，１６（４）：２５３　３陈琦，王旭。孙亚君等．儿轮状病毒肠炎病房内交叉感染．中华医　院感染学杂志，２００２，１２（３）：１８６　４于小东，程芳玲．金标免疫斑点试验快速检测轮状病毒抗原的Ｉ临　床应用．Ｉ临床儿科杂志，２０００，１８（３）：１５８　５莫非，张敏。周黔，等．婴幼儿轮状病毒感染粪便分析．贵阳医学　院学报，２００２，２７（６）：５３３