畜禽消化道寄生虫的粪便虫卵计数检测

生F的种类多，在畜禽体内寄生过程复杂，常见的寄生F有原F类和蠕F类％现介绍两种检测

畜禽消化道寄生F的方法，即稀释F卵计数法和浓集F卵计数法。前者主要是基于Cornell —

Me Master稀释F卵计数法。在寄生F轻度感染定量时,浓集F卵计数法要比稀释F卵计数法 更可靠。关键词：畜禽；寄生F ;粪便；F卵；计数;检测中图分类号：S858

文献标识码：B文章编号：2095 —9737（2019）06 —0010 —021稀释虫卵计数法Cornell— Me Master稀释虫卵计数法：粪便

炭酸晶体以阻止霉菌生长。室温下相对密度至少 应该是1.31。除此之外，还要准备纸杯、压舌板和解剖针。1. 2操作步骤样品称量后按照1 g样品加15 mL水的比例充分 混合，取0. 3 mL的悬液并与计数室内等体积的饱 和蔗糖溶液混合。寄生虫虫卵在介质中漂浮后停

称量10 g粪便置于纸杯中（除去纸杯重量）， 在刻度量筒内加入150 mL水。如果粪便少于

10 g,则水的体积按1 ： 15的比例相应减少％将粪

留在计数室盖玻片的下面％在这种情况下,0.02 g

样本中所有虫卵均位于显微镜视野同一焦距平 便与水彻底混合，借助手持搅拌器仅需几秒钟便 可混匀。悬液可通过滤茶器过滤，除去粗渣，以免 干扰显微镜检查。在检测马的粪便时通常需要这

面，而此处的粪渣相对较少。此时虫卵数乘50便 是每克粪便中虫卵数的估计值。1.1材料要求一操作，但是此操作会降低虫卵计数，因此，如果

天平:称量样品的天平敏感度至少要达到0.1 g。搅拌装置组成：高度和直径比大约为2 : 1的

250〜300 mL量筒以及带有搅拌器的手持电钻％

可能应尽量避免。分别将0. 3 mL饱和蔗糖溶液 加入两边的计数室内。摇匀粪便悬液，取2份

0.3 mL悬液分别将其注入计数室的蔗糖溶液内。

搅拌器是用一根铜棒作柄，用一条旧内管来搅拌％ 搅拌器柄可以通过固定在量筒上带孔橡皮塞自由

用解剖针将样品和蔗糖溶液完全混合，静置

15 min。利用低倍显微镜对每个室内所有虫卵进

滑动。计数室：两个切成窄条的厚玻片将两个载玻

行计数。通过气泡的存在可以很快找到含有虫卵

的焦距。注意计数位于暗区边缘的虫卵。目前, 针对该技术使用刻度计数室进行了许多改进，以 解决计数室光线暗区边缘的虫卵难以计数问题。还有一种可供选择的方法，该方法利用1个

片分开，用双氢氯U嗪黏固剂粘合。上下层玻片 应稍微错开以便于样品注入计数室。清洗计数室

时，可以用流动的冷水冲洗％1 mL的禽结核菌素注射器：将针头接口处去

电动搅拌托盘、1个磁性搅拌棒、1个100 mL烧杯, 以相对密度为1. 2的硫酸镁（泻盐）作为漂浮剂,

掉以免被粗碎片堵塞％饱和蔗糖溶液：向沸水中加入蔗糖颗粒并不 采用预先标有刻度的计数板进行计数。将烧杯置 于天平上，除去其重量，然后于烧杯中称取4 g粪断搅拌，直至不再溶解为止％冷却后，加入几粒石收稿日期：2019 — 01 — 14第一作者简介：熊殿庆（1964 —），男，江苏兴化人，大专，助理兽医师，主要从事动物疫病防治、动物卫生监督工作。现代畜牧科技 2019年第6期总第54期-11 -样。④吸取15 mL（相当于1 g固体粪便）混匀的

便样品。添加约10 dL硫酸镁溶液，用敷药棒或

压舌板尽可能将粪便打碎以便充分混匀％添加硫 酸镁溶液至60 mL体积，加入搅拌棒，中等速度搅

粪便悬液，转移至一个15 mL离心管内％⑤离心

3 min，弃去含有脂肪和溶解色素的上清液。⑥加

拌5 min。用一载玻片作上划线标记，在移液器的 饱和蔗糖溶液（相对密度1. 3）至距离心管顶端

1 cm处,用敷药棒将沉淀重悬，盖上盖子，反转混

尖端和管筒中间刻上标记，折断尖端使管口内径 变宽。需注意的是，巴氏管曾引起多例实验室事

匀4次以上。⑦添加饱和蔗糖溶液至离心管管口

故，使用时应小心。用移液器从搅拌的烧杯里吸 取粪便样品，注入刻度计数板的两个计数室内。

边缘，在上部置一盖玻片％⑧离心10 min。不能

静置5 min使虫卵漂浮至表面，用10倍物镜记录

用固定角度的离心机，离丿L、时离心管必须保持水 平％⑨离心完毕，垂直移走盖玻片并将其和黏附 其上的蔗糖液膜放在载玻片上％⑩在50倍和100

两个计数室网格内的所有虫卵。每克粪便虫卵数 的计算方法为：两个计数室虫卵总数乘50。倍镜下检查载玻片，计数虫卵数。为避免遗漏或视野重叠，开始检查时沿盖玻

2浓集虫卵计数法在寄生虫轻度感染定量时，浓集虫卵计数法

片一边从一个角到另外一个角接着变换视野宽 度继续检查，可以通过集中注意位于或靠近视野 边缘的某一个目标，然后根据这个目标利用显微

。要比稀释虫卵计数法更可靠％当然，可以方便计

数的虫卵数量有限，因此必须选择最适合感染水 平的计数方法。实际工作中的解决方案如下：①称量10g粪便于纸杯中（除去杯重），用量 筒加入150 mL水如果粪便不足10g,可减少水 的用量以保持1 : 15的比例。②将粪便与水彻底 混匀。借助手持搅拌器仅需几秒钟便可混匀镜上的机械平台调节进行视野切换。用此方法对 虫卵进行计数，所提供的数据为每克粪便中虫卵

的最低估计数值。这个估计值可以通过如下操作 来提高：增加一滴饱和蔗糖溶液至离心管中，在上

。边加盖第二个盖玻片，重复第⑦步至第⑩步操作％

。

如果在第一个盖玻片上虫卵数太多，难以计数，则 可用小份样品重复上述步骤，或者稀释后进行虫 卵计数。可能是由于浓集时使用2次蔗糖溶液的 缘故，在检测艾美耳球虫卵囊时浓集方法比稀释

③悬液可通过滤茶器过滤，除去粗渣，以免干扰显

微镜检查％在检测马的粪便时通常需要这一操

作,但是此操作会降低虫卵计数，因此，如果可能

。以上步骤和稀释虫卵计数法一

（上接9页）的物品，配备专用消毒车辆1台％加 大动物管理力度。加强动物的疾病防疫，定期注

的话应尽量避免方法更为有效％5小结人畜共患病越来越多，很多以前并不能感染 人类的病菌，随着变异，已经会对人类构成了极大 的威胁。我们要贯彻好“预防为主”的方针射预防禽流感疫苗和预防传染病疫苗；加强动物 的进出检疫，在发病当年的冬天至第二年春天期间

不引进禽类动物，谢绝一切禽类动物入园。建立疫情检测制度％为使青岛动物园管理处

。做好

饲养管理、防疫卫生、预防接种、检疫、隔离、消毒 等综合性防疫措施，以达到提高动物的健康水平

禽流感预防工作落到实处，确保人与动物的安全， 制定疫情检测制度。每天主管领导、兽医要深入 班组随时观察，掌握第一手资料，对园内出现可疑 症状时，要立即采取措施,做到及时发现，及时隔离％和抗病能力，控制和杜绝传染病的传播，同时也要

提高人的防范意识，做好自我防护。实践证明，只 要做好平时的预防工作，很多传染病可以不致发 生一旦发生传染病，也能及时得到控制参考文献：[1] 华育平.野生动物传染病检疫学[M].北京：中国林业，1999[2] 蔡宝祥.家畜传染病学[M].北京：中国农业出版社，

建立禽流感预防与控制报告制度，确保24 h

信息畅通，严格实行疫情报告、零报告制度，任何 人不得瞒报、缓报、漏报、出现问题要追究责任。 动物园预防禽流感应急小组实行24 h值班制度，。应急小组成员随时待命一旦发生疫情，将听从统 一指挥，各负其责，确保各项应急措施有条不紊的 进行。，，

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